新紫外可见光谱光度计资料.ppt

*;*;*;*;*; 紫外-可见分光光度法是光谱分析的一种。具有较高的灵敏度和准确度，检出限可达10-7 g/ml，相对误差通常为1%～5%。该方法仪器设备简单、操作方便、易于掌握和推广，是常用分析方法之一。;光是一种电磁波，整个电磁波包括：;光子的能量与波长的关系为：;式中，h和c都是常数，; 当一束白光通过一个三棱镜，我们可以看到白光是由许多颜色组成的，这种现象在rainbow中也可以看到。白光的波长大约从400nm～760nm，人的眼睛对这个区域的光是敏感的，因此称为可见光，可见光短波的一端是紫色，长波的一端是红色。;电磁波谱按能量不同可分为：;二、光谱分析法;1. 原子吸收光谱;2. 分子吸收光谱;*;*;当分子吸收能量后，就从基态能级跃迁到激发态能级。分子吸收能量也是量子化的，即只吸收对于两个能级差的能量：;*;*; 在电子能级跃迁的同时，不可避免地伴随分子振动和转动能级的跃迁，使得分子光谱是带状光谱。; （二）发射光谱; 第二节 紫外—可见吸收光谱; 反之，这些不同颜色的光按一定的强度比混合后便又形成白光。;*;物质对光的选择性吸收; 这就是说，并非任一波长的光都可以被某一物质所吸收。由于不同物质的分子组成和结构不同，它们所具有的特征能级也不同，能级差当然也不同。物质只能吸收与其分子内部能级差相等的光，所以物质对光的吸收具有选择性。; 物质具有颜色，就是它对不同波长的可见光具有选择性吸收的结果。物质呈现颜色与它所吸收光的颜色（波长）有一定关系。; 此外，溶液颜色的深浅，决定于溶液吸收光的量的多少，即取决于吸光物质浓度的高低。如CuSO4溶液的浓度愈高，对黄色光的吸收就愈多，表现为透过的蓝色光愈强，溶液的蓝色愈深。因此，可以通过比较溶液颜色的深浅来确定溶液中物质的含量。;1、吸收曲线（吸收光谱）;并测量在每一波长处对光的吸收程度的大小（吸光度），并以波长（?）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标作图，即可得一条吸光度随波长变化的曲线，称为吸收曲线或吸收光谱，它能更准确地描述物质对各种不同波长光的吸收情况。;吸收峰; 分子吸收光谱的形状取决于分子的内部结构，不同分子的内部结构不同，因此，分子吸收光谱是物质定性的依据。;*;第三节 光的吸收定律; 设入射光强度为I0，吸收光强度为Ia，透射光强度为It，反射光强度为Ir，则; 在吸收光度分析中，通常将待测溶液和参比溶液分别置于同样材料和厚度的容器中，让强度为I0的单色光分别通过两个容器，再测量透射光强度。这样，反射光的强度基本相同，其影响可以互相抵消，则; 当一束单色光通过溶液后，由于吸收了一部分光能，光的强度就会减弱。当光透过浓度为c，液层厚度为b 的溶液时，由于一部分光被吸收，因此; 随着溶液浓度和液层厚度的增加，光被吸收的程度增加，透射光的强度减小。透射光强度与入射光强度之比称为透光度（transmittance），用T表示：; 例如，入射光的强度为100，透射光的强度为35，则T = 0.35或35%。; 实践证明，溶液对光的吸收程度与溶液浓度、液层厚度及入射光波长等因素有关。如果保持入射光不变，则溶液对光的吸收程度只与溶液浓度和液层厚度有关，即;为了方便起见：;当a、c一定时，A∝b Lambert’s law;2. 吸收系数 absorptivity;比吸光系数 specific absorptivity;摩尔吸光系数 molar absorptivity;?和 不能直接测得，需用已知准确浓度??稀溶液测吸光度计算得到。;*;*; 第四节 紫外—可见分光光度计;*;*;*;2. 单色器;光栅 grating;狭缝;*;*;检测器; 暗电流 电极的热电子发射而产生的电流。暗电流愈小愈好。在分光光度计中，都设有补偿电路，消除暗电流。; 光电倍增管;*;*;*;*;*;*;*;*;*;光源;第五节分光光度法的定性和定量分析;二、定量方法;校准曲线、线性范围和测定限;2. 标准比较法; 该法只有在测定浓度范围内遵守L-B定律，且cx与cs大致相当时，才可得到准确结果。;（二）多组分定量方法;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*