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免疫扩散实验(双向双扩散);实验目的;实验原理;实验材料;实验步骤;抗体效价测定:用微量加样器于中央孔加入已知抗原,于周围孔加倍比稀释的血清,每个稀释度加1孔。加样时不要使样品外溢或在边缘残存小气泡,以免影响扩散结果。
扩散:加样完毕后,将琼脂板放于湿盒内,保持一定的湿度,置于37℃温箱中扩散24~48小时观察结果。;图1;结果判定;用梅花孔检测抗血清的效价,操作时将抗原置于中心孔,抗血清倍比稀释后置于周围孔,以出现沉淀带的血清最高稀释倍数为该血清的琼扩效价。
若凝胶中抗原、抗体是特异性的,则形成抗原抗体复合物,在两孔之间出现清晰致密的白色沉淀线,为阳性反应。若在72小时内仍未出现沉淀线则为阴性反应。实验时至少要做一阳性对照。出现阳性对照与备检样品的沉淀线发生融合,才能确定待检样品为真正阳性。
; 双向免疫扩散凝胶染色???;注意事项;思考题
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