第12章翻译研究资料.ppt

第 十 二 章;蛋白质的生物合成，即翻译，就是将核酸中由 4 种核苷酸序列编码的遗传信息，通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。;第 一 节;20种氨基酸(AA)作为原料 酶及众多蛋白因子，如IF、eIF ATP、GTP、无机离子;一、翻译模板mRNA及遗传密码; mRNA上存在遗传密码;遗传密码表;从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 ;1. 连续性(commaless);插入或缺失，可能导致框移突变(frameshift mutation)。 ;2. 简并性(degeneracy);2. 简并性(degeneracy);3. 通用性(universal);4. 摆动性(wobble);摆动配对;密码子、反密码子配对的摆动现象;二、核蛋白体是多肽链合成的装置;rpL 49种;三、tRNA与氨基酸的活化（转运工具）;氨基酸 + tRNA;氨基酸;氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。;真核生物： Met-tRNAiMet 原核生物： fMet-tRNAifMet;第 二 节;翻译的起始(initiation) 翻译的延长(elongation) 翻译的终止(termination );一、肽链合成起始;核蛋白体大小亚基分离； mRNA在小亚基定位结合； 起始氨基酰-tRNA的结合； 核蛋白体大亚基结合。;IF-3;A;IF-3;IF-3;IF-3;（二）真核生物翻译起始复合物形成;二、肽链合成延长;延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 ;EF-2;（一）进位;Tu;（二）成肽;延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。;fMet;;真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。;三、肽链合成的终止;终止相关的蛋白因子称为释放因子(release factor, RF) ;U;——使蛋白质合成高速、高效进行。;电镜下的多聚核蛋白体现象;第 三 节;从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。;一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质;一般认为，多肽顺序储存着蛋白质折 叠肽链自身氨基酸的信息，即一级结 构是空间构象的基础。;几种有促进蛋白折叠功能的大分子;1. 热休克蛋白(heat shock protein, HSP) HSP70、HSP40和GreE族 2. 伴侣素(chaperonins) GroEL和GroES家族;热休克蛋白促进蛋白质折叠的基本作用 属于应激反应性蛋白，高温可诱导其合成增加，包括HSP40、HSP70 、GrpE三族。可结合保护待折叠多肽片段，再释放该片段进行折叠。;伴侣素GroEL/GroES系统促进蛋白质折叠过程 ;蛋白二硫键异构酶 ;肽-脯氨酰顺反异构酶 ;二、一级结构的修饰;鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰;三、高级结构的修饰;蛋白质合成后需要经过复杂机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位，这一过程称为蛋白质的靶向输送。 ;第 四 节;蛋白质生物合成是很多天然抗生素和某些毒素的作用靶点。它们就是通过阻断真核、原核生物蛋白质翻译体系某组分功能，干扰和抑制蛋白质生物合成过程而起作用的。 ;抗生素(antibiotics) 是微生物产生的能够杀灭或抑制细菌的一类药物。;一、抗生素类;四环素族;嘌呤霉素作用示意图;二、其他干扰蛋白质生物合成的物质;白喉毒素(diphtheria toxin)的作用机理;干扰素的作用机理;2. 干扰素诱导病毒RNA降解;在??白质生物合成中，各种RNA起什么作用？ 2. 请讨论为什么20种氨基酸有61个密码子为它们编码？ 3. 原核生物和真核生物在蛋白质合成个阶段有何异同？ 4. 简述蛋白质生物合成的延长过程。 5. 翻译的终止过程如何与下一轮的起始过程 相衔接？ ;Thank You !