第1部分专题5课题1DNA的粗提取与鉴定资料.pptVIP

第 1 部分; 1.DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低。 2．DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋 白质溶于酒精，可利用酒精将DNA和蛋 白质分开。 3．DNA对蛋白酶、高温和洗涤剂有耐受性。 4．在加热条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 5．哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核，不能作为提取DNA的实 验材料。若选取肝脏细胞或植物细胞，则必须充分研磨。 6．实验中加入柠檬酸钠的作用：作为抗凝剂，防止血液凝固。; [自读教材·夯基础] 1．原理 (1)DNA和蛋白质等其他成分在 溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的 就能使DNA充分溶解，而使 沉淀，或者相反，以达到分离目的。 (2)DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，这样可将DNA和蛋白质进一步分离。; 2．DNA的耐受性 (1)蛋白酶不能水解 ，能水解 。 (2)DNA在 变性，大多数蛋白质在 就可以变性。 (3)洗涤剂不能分解 ，但可以瓦解 。; 如何将DNA进一步提纯？提纯后是否能得到纯净的DNA? 提示：利用DNA不溶于冷酒精，而蛋白质溶于冷酒精的原理进一步提纯DNA。提纯后的DNA中仍含有一定量杂质。;[跟随名师·解疑难];;[自读教材·夯基础];蒸馏水;NaCl溶液; 1．可否选用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，为什么？ 提示：不可以，因为哺乳动物成熟红细胞无细胞核。 2．提纯时，为什么要选用体积分数为95%的冷酒精？ 提示：冷酒精提纯效果更好。;; 2.实验过程中的几点注意事项 (1)两次使用蒸馏水的作用：第一次用蒸馏水是使鸡血细胞吸水涨破，提取核DNA；第二次用蒸馏水稀释NaCl溶液，使DNA析出。 (2)实验中三次过滤操作的比较：; (3)用玻璃棒搅拌时，动作要缓慢且沿同一方向进行，目的是防止DNA被破坏。 (4)实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，可减少提取过程中DNA的损失。 3．结果分析及评价 (1)现象是否明显及可能原因： 若实验结果不明显，可能的原因是： ①材料中核物质没有充分释放出来，如研磨不充分或蒸馏水的量不够。 ②加入酒精后摇动或搅拌时过猛，DNA被破坏。 ; ③二苯胺最好现配现用，否则二苯胺变成浅蓝色，影响鉴定效果。 ④析出含DNA的黏稠物时，蒸馏水要沿烧杯内壁慢慢地加入，不能一次快速加入，否则会影响实验结果。 ⑤实验中有多次搅拌，但是其目的及操作方法是不同的，要注意区分，否则也会影响结果。 (2)分析DNA中的杂质： 本实验提取的DNA粗制品中有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质。;[特别提醒] ①若选取肝脏细胞或植物细胞，则必须充分研磨。 ②柠檬酸钠的作用是作为抗凝剂，防止血液凝固。 ③吸去上清液的原因是DNA主要存在于细胞核中。; [例1] 关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验，该实验依据的实验原理不是 (　　) A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，随着NaCl溶液浓度的不同而不同 B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA C．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂 D．在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应; [解析]　本实验依据的原理是A、B、D项三个方面。必须明确的是NaCl的浓度为0.14 mol/L时，DNA的溶解度最小，具体操作时用2 mol/L的NaCl溶液，再加水稀释至黏稠物(主要是DNA)不再增多时，此时该溶液浓度即为0.14 mol/L。C项是DNA的性质，不能作