当归挥发油对血管紧张素Ⅱ所致心肌细胞肥大CaN通路及T通道的影响.pdf

目录 中 文 摘 要 1 ABSTRACT 3 缩 略 词 5 前言 6 立题依据 7 ⒈现代医学研究 7 1.1 中药的钙通道作用 7 1.2 有效成分及复方的钙通道作用 7 1.3 高血压左心室肥厚的研究进展 11 1.4 高血压左心室肥厚的中医研究 13 实验一 心肌细胞的传代培养及肥大模型的建立 16 1.1 材料 16 1.1.1 细胞与试剂 16 1.1.2 仪器 17 1.2 方法 17 1.2.1 H9c2 心肌细胞培养 17 1.2.2 心肌细胞生长曲线的绘制 18 1.2.3 心肌细胞形态学观察 19 1.2.4 MTT 法确定药物剂量 19 1.2.5 统计学分析 20 1.3 结果 20 1.3.1 乳鼠心肌细胞的原代培养 20 1.3.2 心肌细胞生长曲线(图 1-2)。 20 1.3.3 MTT 法测定心肌细胞细胞活性 20 1.3.4 血管紧张素Ⅱ对心肌细胞的促肥大效应 20 万方数据 1.4 讨论 22 1.4.1 心肌细胞的培养 22 1.4.2 心肌细胞肥大模型的建立 22 1.5 结论 23 1.6 附录(图片结果) 24 实验二 当归挥发油的超临界萃取及药物浓度的确定 27 2.1 材料 27 2.1.1 药材 27 2.1.2 仪器与试剂 27 2.2 方法 27 2.2.1 当归挥发油 CO2 超临界萃取工艺流程 27 2.2.2 心肌细胞原代培养(同实验一) 28 2.2.3 MTT 法确定当归挥发油的剂量 28 2.3 统计学分析(同实验一) 28 2.4 结果 28 2.4.1 当归挥发油成分分析结果 28 2.4.2 当归挥发油对正常心肌细胞的影响 29 2.5 讨论 30 2.6 结论 31 实验三 当归挥发油对血管紧张素Ⅱ致心肌细胞肥大的影响 32 3.1 材料 33 3.1.1 实验细胞(同实验一) 33 3.1.2 试剂 33 3.1.3 仪器 35 3.2 方法 36 3.2.1 乳鼠心肌细胞原代培养(同实验一) 36 3.2.2 肥大模型的建立和实验分组 36 万方数据 3.2.3 MTT 法检测各组心肌细胞的生长抑制效应 36 3.2.4 激光共聚焦检测线粒体膜电位和细胞内钙离子浓度 37 3.2.5 蛋白印迹法检测蛋白 CaN、Cav3.1、Cav3.2、Caspase-3、 C