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PAGE  PAGE 13 年度编号 研究生科研实验资助项目申请书 项 目 名 称 金磁标层析试纸条快速定量 检测黄曲霉毒素的研究 申 请 人 姓 名 王 艳 霞 导 师 姓 名 崔 亚 丽 学 科 专 业 生物化学与分子生物学 申 请 人 单 位 生命科学学院 申 请 日 期 2010年10月9日 西 北 大 学 研 究 生 处 二〇一〇年九月制 一、基本情况 项目名称金磁标层析试纸条快速定量检测黄曲霉毒素的研究姓名王艳霞学号200921017单位名称生命科学学院专业生物化学与分子生物学指导老师崔亚丽电话电子信箱wangyanxia2009ok@163.com学位论文题目纳米金磁微粒检测黄曲霉毒素中的应用申请资助金额（元）0.5万元预计完成时间二年导师是否有配套资助资金是配套资助资金金额0.5万元二、项目依据 本项目的理论意义和实践意义、项目创新点、国内外研究状况分析。 黄曲霉毒素(Aflatoxins,简称AFT)是本世纪60年代初发现的由曲霉属中的黄曲霉和寄生曲霉所产生有毒代谢产物，它是一种肝脏毒素，是迄今为止发现的毒性最强的生物毒素之一。AFT同时具有致癌作用；1993年，世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构将其划定为一类致癌物。目前已经在粮食、油料作物的种子、干果、调味品、发酵产品和饲料内，甚至在一些酒类等等多种农产品及制品中发现了AFT的存在。AFT结构都含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮；已经发现的AFT有B1、B2、B2a、G1、G2、M1、M2、Q1、Q2a等17种之多，其中AFB1毒性最强。 目前国内建立的针对AFT的免疫检测方法主要有：薄层色谱法、高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法、质谱法、放射免疫测定法、免疫亲和柱法和电化学法等。其中高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法、质谱法、放射免疫测定法、免疫亲和柱法等亦可很好的完成定量工作，检测线甚至可以达到6ppt。然而这些方法存在操作复杂、过程烦琐、检测时间长、劳动强度大，存在很大的安全性，仪器设备昂贵、需要专门的技术人员等缺点。快速ELISA、免疫亲和柱-荧光计法，电化学等方法同样需要配备相应的仪器设备。寻求快速、准确且经济可行的检测方法已成为AFT研究中亟需解决的任务之一。胶体金层析试纸法在定性检测方面具有简单、快速（3-5min）、灵敏 (4 ng/mL或更低)，无需仪器设备，可以很方便的在实验室、农场、饲料混合车间等多种场所进行实地测定。更重要的是，该方法检测成本低，便于广泛的推广和应用，在AFT检测方面具有广阔的应用前景。但该方法依然存在不能实现样品定量的缺点。 核壳型磁性纳米微粒是一种金包被的Fe3O4纳米粒子，该微粒中的Fe3O4具有超顺磁性，表面包被的金又具有纳米金的光学性质；其表面经过功能化修饰后，金磁微粒具有良好的分散性和在缓冲液中抗团聚能力，同时末端的功能化基团能偶联各种生物大分子（特定的核酸片段、抗体、抗原等）。这些特性使该磁性纳米微粒可以很好的用于医学领域和生物分子的定性定量检测；既方便快捷，又可实现可目视化。本研究正是充分利用了纳米金磁微粒的这些特性，用纳米金磁微粒代替胶体金，研制金磁标层析试纸，以实现对黄曲霉毒素的定性定量测定。该方法既可克服胶体金层析试纸不能定量的重大弊端，又具有试纸检测的巨大的优越性，具有广阔的应用前景。三、研究基础 1.近期已取得的与本项目有关的主要研究成果 进入实验室以来，在前人成果的基础上，对合成的核壳型磁性纳米微粒进行表面功能化修饰，得到了具有纳米光学效应的超顺磁性纳米金磁微粒，以下是相关的研究结果： （1）合成得到纳米级金磁微粒，其TEM照片及表面Zeta电位的检测结果如下： Zata potential：40.5mv （2）具有较高稳定性的纳米金磁微粒，具备特有的光学效应，结果如图所示： 在经过不同方式处理后的纳米金磁微粒，具有特有的颜色，照片如下图所示： 由于纳米级金磁微粒兼有超顺磁性以及胶体金的光学性质，该材料是分子检测的良好的标记材料，通过前期的摸索实验，已经能够用在检测人绒毛膜促性腺激素(HCG)，检测结果如下图所示： 2.已有研究条件 生命科学学院的生物化学与分子生物学的项目和专业平台依托于国家微检测系统工程技术研究中心，中心以集成生物学、化学、材料学、精密机械加工、光电子检测等领域的前沿技术和多学科交叉为特点，通过装置微型化，实现生物医药领域微量化检测的高度集成。中心现有工程技术研究人员六十余人（包括9位海外专家），培养及共同培养博士、硕士近60