第七章 高效液相色谱法.pptx

第七章 高效液相色谱法;六、树脂预处理及再生 七、实验技术 八、 离子交换法的应用 §7-5 凝胶色谱 一、基本原理 二、凝胶的种类 三、操作方法 四、应用;;第七章 高效液相色谱法; §7-1 一般流程及分离原理 一、简介 1.与经典的液相柱色谱法相比 (1)柱内径↓，填充剂粒度↓、均匀性↑，新型固定相的问世 → 分离效率↑。 (2)柱长↓，填充剂机械强度↑，供液压力和进样压力↑，流动相流速↑（1~5ml/min）→分离速度↑（7~8个峰/10min）。 (3)采用光学原理的检测器→灵敏度↑。 ; 2.与GC相比 (1)样品受限制少，对易分解、不容易气化、分子量大、高极性的有机物（70~80%的有机物）可用HPLC分析。 (2)不用制备衍生物，减少了误差。 (3)进样量大（500~800μL），易制备。 (4)分离效率降低。;二、一般分离流程;;用液液分配色谱的机理来讨论高效液相色谱的普遍性问题。 ;四、色谱分离两大特点：差速迁移、谱带扩展; §7-2 高效液相色谱检测器 目前应用较多的有紫外吸收检测器、荧光检测器、电化学检测器、化学发光检测器、蒸发光散射检测器、安培检测器及示差折光检测器等。 1.紫外