综合化学实验I之色素提取和分离.pptVIP

植物中叶绿体色素的 提取和分离 ; 实验目的 实验原理 试剂及仪器 实验步骤 注意事项;一、实验目的 ;二、实验原理 ;叶绿素a(R=CH3) 叶绿素b(R=CHO);;吸附色谱是以氧化铝、硅胶等为吸附剂，将一些物质从溶液中吸附到它的表面上；然后用溶剂洗脱或展开，利用不同物质在吸附剂和溶剂之间分布情况不同而得到分开。如柱色谱和薄层色谱。 分配色谱是利用混合物的组分在两种种互不相溶的液体中分布情况不同而得到分离。这样的分离不经过吸附程序，仅由溶剂的萃取来完成，相当于一种连续性溶剂萃取方法。;薄层色谱 ;吸附剂 薄层色谱中常用的吸附剂是硅胶和氧化铝。其中硅胶分为硅胶G(含有煅石膏粘合剂)、硅胶H(不含粘合剂)、硅胶HF254(含荧光物质)。氧化铝也根据含粘合剂或荧光物质分为氧化铝G、氧化铝G F254、氧化铝HF254。;1：薄层板为什么要活化？ 2：在混合物的薄层色谱中，如何定性的判定各组分在薄层上的位置。; Rf值(比迁移值) 比迁移值是表示色谱图上斑点相对位置的一个数值。 各种物质的Rf值因其结构、吸附剂种类、展开剂、温度等不同而异。当上述条件固定时，对于一个物质来说比迁移值(Rf值)是一个特性常数，可以用来鉴别不同化合物，还可用于物质的分离和定量测定。 ;三、试剂及仪器;四、实验步骤;四、实验步骤;四、实验步骤;; 画滤液细线;;四、实验步骤;(3) 展开*。将点好样的硅胶板放入展开缸里，液面不能超过点样线，盖好盖子进行上行层析。待展开剂前沿上升到距硅胶板上端1.5~2 cm时，取出硅胶板置于通风橱里晾干，可看到层析板上出现若干色素带(4)样品收集,用刀片刮入试管中，加入5mL丙酮提取，低温避光保存。(5) 计算Rf值;分光光度法测定叶绿素a、叶绿素b及总量（选作）; 实验中的注意事项;一;错误做法