酶与蛋白质工程第1章蛋白质与蛋白质工程资料.ppt

第一讲 蛋白质与蛋白质工程;蛋白质在生命活动中的重要作用 ;蛋白质的基本结构单位—氨基酸 ;H;含非极性侧链基团;含芳香基团 ;含酸性侧链基团（带负电荷） ; 氨基酸的两性解离 ;pH=pI; 等电点 (isoelectric point, pI) 在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点 氨基酸在等电点时的特点： 1. 净电荷数等于零，在电场中不移动； 2. 此时氨基酸的溶解度最小 ;蛋白质的化学结构和高级结构 ;+;多肽（polypeptide）和多肽链（polypeptide chain）;— C — NH —;肽平面/酰胺平面;由于α-碳原子与其他原子之间均形成单键，因此两相邻的肽键平面可以作相对旋转 ;肽平面;蛋白质的一级结构 ;将肽段顺序进行叠联以确定完整的顺序;一级结构测定的基本流程:; ;N-末端和C-末端氨基酸残基的确定— 为氨基酸序列排列建立两个重要的参考点;② 丹磺酰氯法 (DNS法) ;③ 苯异硫氰酸(酯)法 (PITC法、PTC法、PTH法、Edman降解法 ) ;C末端分析方法;多肽链部分裂解成较小的片段—化大为小，获得短肽段;胰蛋白酶： R1=赖氨酸Lys和精氨酸Arg侧链 (专一性较强，水解速度快) ; R1=苯丙氨酸Phe, 色氨酸Trp, 酪氨酸Tyr ;重建完整多肽链的一级结构—获得多肽链的完整序列;分子进化 ;蛋白质的高级结构 ;（1）非共价键 氢键 离子键 范德瓦尔力 疏水作用 （2） S-S键;蛋白质结构层次 ;蛋白质的主要结构层次;二级结构 ; α-螺旋（ α-helix）;卷发(烫发)的生物化学基础; β-折叠（ β-sheet）;?-角蛋白; β-转角（ β-turn）;超二级结构 ; 结构域 ;三级结构 ;四级结构 ;多肽、蛋白结构与功能的关系 ;正常红细胞与镰刀形红细胞的扫描电镜图; 谷氨酸（极性） 缬氨酸（非极性）;镰刀状贫血病—血液中大量出现镰刀红细胞，患者因此缺氧 窒息;蛋白质的正确折叠与分子伴侣 ;疯牛病病牛的海绵样脑组织;蛋白质的变构;(R) relaxed state;血红蛋白和肌红蛋白的氧合曲线 ;26S Proteason-蛋白质的泛素化降解系统;2004 Nobel Prize: Ubiquitin ; 在高等植物中分布很广，根、茎、叶、花、果实、种子及胚芽鞘中都有，大多集中在生长旺盛部位 ;Aux/IAA介导生长素信号途径;When to flower-to be or not to be;Photoreceptor regulation of CO;蛋白质工程;蛋白质的改造 通过改造它们的基因，再用基因工程的方法由工程菌种来生产新的蛋白质 ;当前蛋白质工程研究的热点： 一方面是对具有明显生物学功能的天然蛋白质分子； 另一方面是基于生物大分子结构知识的药物设计 ;蛋白质人为进化;tRNA介导的蛋白质工程;蛋白质修饰;主要问题;next