PCR扩增实验.pptVIP

PCR扩增实验;扩增反应;1)按以下次序，将各成分在0.5ml灭菌离心管内混合：(100ul) ddH2O 79ul 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物， 2ul (终浓度为0.2mmol／L) MgCl2 6ul (终浓度为1.5mmol／L) 引物1 1ul (终浓度为50pmmol／L ) 引物2 1ul (终浓度为50pmmol／L ) 模板DNA 1ul 2)100℃加热反应混合液10分钟，冰浴5′，使DNA完全变性。 3)将1ulTaqDNA聚合酶(5单位/ul)，加入反应混合液中。 4)用100ul石蜡油覆盖于反应混合液之上，防止样品在反复加热-冷却的过程中蒸发。;5）按以下方法进行PCR反应： 常用循环参数：①变性：94℃ 1分钟、②退火：55℃ 1分钟、③延伸：72℃ 1分30个