雷帕霉素对UUO大鼠细胞自噬及肾小管间质纤维化的影响.pdfVIP

雷帕霉素对??笫笊鲈嘞赴?允杉吧鲂」芗渲氏宋??挠跋?转化生长因子?摘要目的：肾小管间质纤维化是由各种慢性进展性肾脏疾病不可避免的最终结局。肾间质纤维化的发生发展过程复杂，此过程涉及肾小管间质的损伤，炎性细胞的浸润，多种炎症介质的产生，纤维母细胞的增殖，细胞外基质积聚等过程，多种细胞因子参与其中。最近几年里，自噬在肾脏中的作用逐渐为人们所关注，一系列研究表明，自噬与多种肾脏疾病相关。既往研究显示，自噬功能增强通常对肾脏功能保护有益，然而，在某些情形下，过度的自噬可能造成细胞凋亡或死亡。近年来对肾脏有关自噬方面的研究多集中肾小球上皮细胞、肾脏系膜细胞方面，对于肾小管细胞的研究多限于缺血一再灌注损伤、药物性肾损害，而对于梗阻性肾病与自噬的相关研究较少。目前普遍认为，自噬的诱导由哺乳动物雷帕霉素靶蛋白???所调控，??是一种非典型的丝氨酸激酶，在进化上十分保守，广泛存在于各种哺乳动物中，可调节细胞增殖、生长以及自噬。当细胞处于营养充足或缺少应激信号的状态时，??激活，自噬受到抑制。然而，一旦处于营养缺乏或者是应激状态，??活性下降或受到抑制，自噬进程启动。细胞饥饿时诱导自噬的目的在于降解细胞内蛋白质，最终获得氨基酸再度为细胞供应新的能量来源。当??活性下降时，自噬相关蛋白????チ姿峄??市砥溆?另一个??纬苫罨?酆衔顰??８镁酆衔锲舳?税资商迥さ男纬桑??后自噬体膜延伸包裹待降解的内容物。该膜的延展包括了多种??鞍祝?其中最重要的是蛋白轻链???琇?表达水平被普遍地用作自噬标记物，广泛地应用于免疫组化等实验方法中。????????????．??被认为是肾小管问质纤维化病理进程中的一个中心媒介。它可以促进细胞外基质成份大量生成，促进炎症细胞的活化和趋化活动，介导肾小管上皮细胞向间充质细胞转化，以及导致肾小球硬化及小管间质纤维化，最终发展至终末期肾中文摘要???? 雷帕霉素，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白?????mTOR)????????????????????????????????????????????????????????疫抗生素，目前主要应用于移植后抗排异反应。近年来研究发现，该物质在抑制肾间质纤维化方面有所成效，这可能与自噬有关。但目前尚未有研究证明雷帕霉素对梗阻性肾损伤中细胞自噬有何种程度的影响，梗阻后自噬水平与时间的变化有着何种关联，以及其与肾脏纤维化之间的关系。因??????????????????SD??????????????????????(unilateralobstruction??UUO)??????????????????????????????????????????????????????????????????????TGF??t3???、??表达随时间所发生的变化，探讨雷帕霉素对肾间质纤维化的潜在保护作用，探索肾间质纤维化治疗的新靶点，为肾间质纤维化的临床防治探索新的可能方向。??????????????SD??????SPF????????(180??20)????54????????1??????????????????????????????????1????????(A??)??2??UUO模型组?组??、雷帕霉素治疗组?组?幻孔楦??弧７直鹩谑鹾蟮?、7??14??????????6??????????????????????????????????D3??D7??D14??????????6??????????????B??C??????????10??????????(0??1ml??kg)腹腔注射?％盐酸利多卡因皮下麻醉。备皮消毒铺单后，给予左侧腹部纵形切口，暴露左肾下极后，沿之寻找左侧输尿管，在左侧输尿管中上??交??????????2??????????????????????????1??3??????????????????????????????A??????????????????????????????????????B??C??????????给药：从手术前?炜J迹??韪髯榇笫竺刻旃辔?次，每周复查体重，????????????????????????????????????????2?／?／?亮抗辔福籄组??B??????????0??9??NaCl??????????????????????????????????????制食水。术后第?臁?天、?天，分别从??、?橹兴婊?∪?只????????????????4??????????????????????????????HE??????Masson染色，以观察各组大鼠梗阻肾组织病理变化，并采用免疫组织化学方法测定??猵????癓?表达水平，应用图像分析系统进行半定量分析。所有实验数据用??20??0???????