Capn4在肾透明细胞癌中的表达和其在侵袭转移中的功能研究.pdfVIP

Capn4 在肾透明细胞癌中的表达及其在侵袭转移中的功能研究 中文摘要 Capn4 在肾透明细胞癌中的表达及其在侵袭 转移中的功能研究 中文摘要 肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，大约 有 70%的肾细胞癌是透明细胞肾细胞癌（clear cell renal cell carcinoma，ccRCC），转 移是肾细胞癌导致死亡的主要原因，而肾癌发生转移的机制尚不清楚。μ-型钙蛋白酶 （μ-calpains）在哺乳动物各组织中广泛表达，它是一种由催化亚基和调节亚基组成 的异源二聚体，其中小的调节亚基为钙蛋白酶小亚基-1（Calpain small subunit 1， Capn4）。研究发现 Capn4 在促进细胞的迁移、增殖和分化中发挥重要作用，已经发 现其在肝癌、胆管癌及乳腺癌的转移过程中发挥重要作用。本研究应用人肾透明细胞 癌组织标本及细胞模型，检测 Capn4 在肾透明细胞癌组织中的表达水平，并分析 Capn4 表达与预后的相关性；研究 Capn4 对肾透明细胞癌细胞趋化运动及迁移、侵袭能力的 影响，并初步探讨可能的作用机制，以期找到肾透明细胞癌新的预后标志物和有效的 治疗靶点。 第一部分 Capn4 在肾透明细胞癌中的表达及临床意义 目的：研究肾透明细胞癌组织及癌旁组织中 Capn4 的表达，分析其与临床病理 特征之间的关系，探讨其与 ccRCC 患者临床预后的关系。 方法：采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction，qRT–PCR)、Western blotting 及免疫组化检测 75 例 ccRCC 组织和癌旁正常肾组织的 Capn4 的基因及蛋白表达情况，并对其进行比较和相关分 析。 结果: qRT-PCR、Western blotting 结果显示：ccRCC 组织与正常肾组织中均有 Capn4 的基因和蛋白表达，在 ccRCC 组织中 Capn4 的表达明显高于癌旁组织，差异 具有统计学意义。免疫组化检测结果显示 Capn4 的表达与 ccRCC 的分期、分级、淋 I 中文摘要 Capn4 在肾透明细胞癌中的表达及其在侵袭转移中的功能研究 巴结转移、肿瘤大小及局部侵润有关，Capn4 与 ccRCC 患者生存期之间 Kaplan-Meier 生存曲线分析提示，Capn4 高表达组的 ccRCC 患者的生存率低于 Capn4 低表达组患 者，差异有统计学意义。 结论：人 ccRCC 中 Capn4 高表达，其表达水平与肾癌的分期及淋巴结转移相关； Capn4 高表达患者预后较差，生存期较短，提示 Capn4 高表达在肾透明细胞癌中可能 具有重要意义。 第二部分 Capn4 在肾透明细胞癌侵袭转移中的作用及机制探讨 目的：通过检测 Capn4 对肾透明细胞癌细胞增殖、运动、粘附及迁移侵袭能力 的影响，初步探讨 Capn4 在肾透明细胞癌侵袭转移中的作用及机制，以期找到肾透明 细胞癌新的预后标记物和治疗靶点。 方法： 1.qRT–PCR 方法检测 786-0 、ACHN、Caki-1、Caki-2 四种不同转移潜能的肾癌 细胞系中 Capn4 的表达水平。 2.应用合成的小干扰 RNA 质粒转染 786-0