氨基酸分离鉴定中显剂为什么不能用茚三酮水溶液.docVIP

氨基酸分离鉴定中显色剂为什么不能用茚三酮水溶液 茚三酮根很多种氨基酸都显示紫色 没办法分离鉴定呀 茚三酮使氨基酸显色原理 α氨基酸与茚三酮在弱酸性溶液中共热，反应后经失水脱羧生成氨基茚三酮，再与水合茚三酮反应生成紫红色，最终为蓝色物质。脯氨酸等仲胺氨基酸与茚三酮反应生成黄色物质。该反应可广泛用于各种氨基酸的定性或定量测定。 阿尔法氨基酸与水合茚三酮一起加热，经氧化脱氨变成相应的阿尔法酮酸，酮酸进一步脱羧变成醛，水合茚三酮被还原成还原成还原型茚三酮。在弱酸性溶液中，氨、还原型茚三酮，和另一分子水合茚三酮反应，缩合成蓝紫色物质。 注意事项 （1）被分离物质在该溶剂系统中Rf在0.05～0.8之间，各组分之Rf值相差最好能大于0.05，以免斑点重叠。 （2）溶剂系统中任一组分与被分离物之间不能起化学反应。 （3）被分离物质在溶剂系统中的分配较恒定，不随温度而变化，且易迅速达到平衡，这样所得斑点较圆整。 本实验采用八种混合氨基酸为样品，用酸性和碱性两种溶剂进行双向层析，以茚三酮为显色剂，可获得分离清晰的层析图谱，如图3.2所示。 ? 注意事项 （1）烘箱加热温度不可过高，且不可有氨的干扰，否则图谱背景会泛红。 （2）第一相溶剂最好在使用前再按比例混合，否则会引起酯化，影响层析效果。 （3）整个实验操作应戴手套进行。 思考题 1．酸性与碱性溶剂系统对氨基酸极性基团的解离各有何影响？ 2