菌种的复壮与保藏(陈)介绍.ppt

;第一节 菌种的衰退和复壮;（一）菌种衰退的具体表现;总之，退化是发生在群体细胞中的一个从量变到质变的逐步演变过程，由于个别突变细胞表现生长优势，导致在群体中最后数量占优势。;（二）菌种衰退的原因;;;（三）菌种衰退的防治;;;;;; 二、菌种的复壮 侠义的复壮：菌种已经发生衰退后，再通过纯种分离和性能的测定等方法，从衰退的群体中找出尚未衰退的少数个体，以达到恢复该菌种原有典型性状的一种措施。 广义的复壮：一种积极的措施，即在菌种的生产性能尚未衰退前经常有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作，使菌种地生产性能逐步提高。; 纯种分离法 寄主体内复壮法 淘汰法 遗传育种法;;;;;第二节 菌种的保藏;世界上国际知识产权组织承认的法定保藏机构有28家。 Ex： 美国的标准菌种保藏所（ATCC） 美国农业部农业研究服务部（ARS） 英国国立标准菌种保藏所（NCTC） 我国：中国科学院微生物研究所的普通微 生物菌种保藏管理中心（CCGMC） 武汉大学的中国典型培养物保藏中心 （CCTCC）;二、微生物菌种保藏技术;斜面保藏法 穿刺保藏法 石蜡油封藏法 沙土管干燥保藏法 ;斜面保藏法 接种适宜斜面培养基 →培养→4℃保藏 适用：各大类 保藏期：3~6个月 缺点：保存期短，传代多，易退化 ; 点接：把菌种点接在斜面中部偏下方处。适用于扩散型生长及绒毛状气生菌丝类霉菌（如毛霉、根霉等）。 中央划线：从斜面中央自下而上划一直线。适用于细菌和酵母菌等。 密波状蜿蜒划线法:从斜面底部自下而上划密“之”字形线。能充分利用斜面获得大量菌体细胞，适用于细菌和酵母菌等。 挖块接种法:挖取菌丝体连同少量培养基，转接到新鲜斜面上。适用灵芝等担子菌类真菌。 ;; 半固体穿刺保藏法 穿刺接种适宜半固体→培养→4℃保藏 适用：细菌，酵母等 保藏期：6~12个月 用接种针从原菌种斜面上挑取少量菌体，从柱状培养基中心自上而下刺入，直到接近管底（勿穿到管底），然后沿原穿刺途径慢慢抽出接种针。;; 砂土管干燥保藏法 措施：无营养，缺氧，干燥 方法：孢子??芽孢悬液 → 加入无菌砂土管中→ 干燥→ 封口 → 5℃保藏 适用：产孢子的丝状真菌、放线菌；有芽孢的细菌 保藏期：1~10年或更长 ;河沙;;无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上，长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中，增殖培养后再转接斜面。;真空冷冻干燥保藏法：;;安培瓶冻干机; 液氮超低温保藏法;;;菌种冻存管;悬滴保藏法 措施：无营养，悬浮，溶液 方法：寡营养保藏，放置10℃或室温 适用：丝状真菌、酵母、肠道细菌 保藏期：1年或更长 ;低温保藏法;;三、菌种保藏的注意事项;本章重点