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第二章 DNA重组;自学为主;5 DNA片段的连接重组;5.1 DNA连接酶的发现;在大肠杆菌及其它细菌中，DNA连接酶催化的连接反应，是利用NAD＋[烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(氧化型)]作能源的；
而在动物细胞及噬菌体中，则是利用ATP[腺苷三磷酸]作能源。 ;;5.2 DNA连接酶的基本性质;;;5.3 分类;10×连接缓冲液;;同种内切酶产生的粘性末端的连接
同尾酶产生的粘性末端的连接
不同粘性末端的连接;5.5.1同种内切酶产生的粘性末端的连接;5.5.2同尾酶产生的粘性末端的连接;5.5.3不同粘性末端的连接;5.5.4平末端的直接连接;5.5.4平末端的直接连接;直接用T4DNA连接酶连接平末端;5.5.5末端修饰后的连接;DNA片段末端同聚物加尾后连接;粘性末端修饰成平末端后再连接;5.5.6加上连杆后再连接;;; DNA连杆连接法尽管有诸多方面的优越性，但也有一个明显的缺点，那就是如果待克隆的DNA片段或基因的内部，也含有与所加的连杆相同???限制位点，这样在酶切消化连杆产生粘性末端的同时，也就会把克隆基因切成不同的片段，从而为后继的亚克隆及其它操作造成麻烦。
当然，在遇到这种情况时，一个方法可改用其它类型的连杆，另一种公认的较好的替代办法是改用DNA接头(adapter)连接法。 ;5.5.7DNA接头(adapter)连接法;;小结：平末端DNA片段的连接;
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