第三章细胞生物学方法(xiugai)探析.ppt

第三章 细胞生物学研究方法;本章内容提要;第一节 细胞形态结构的观察方法;;;—、光学显微镜技术;;;3. 分辨率;光学显微镜的分辨率;显微镜的几个光学特点;;;（二）倒置显微镜;;（三）荧光显微镜(Fluorescencemicroscope);荧光显微镜;;;用于观察能激发出荧光的结构。用途：免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断。;;（四）相差显微镜;;;（五）暗视野显微镜（dark fieldmicroscope）;;（六）荧光漂白恢复技术（FRAP);二、电子显微镜;（一）、激光扫描共聚焦显微镜;; 激光扫描共聚焦显微镜;;;（1）超薄切片 用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，用超薄切片（ultramicrotome）制作。通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属（铀、铅）盐染色。;;(2) 负染技术（Negative staining）;(3)冰冻蚀刻 freeze-etching;? 是分离细胞器（如细胞核、线粒体、高尔基体）及各种大分子基本手段。 ? 转速小于2500r/min的离心机称为高速离心机。 ? 转速2500-50000r/min，称为超速离心机。 ?转速高于50000r/min，称为超高速离心机。 ? 目前超速离心机的最高转速可达10