08平板菌落计数法课程.pptVIP

实验八 平板菌落计数法; 一、目的要求 　　学习平板菌落计数的基本原理和方法。 　　二、基本原理 　　平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的，也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时，先将待测样品作一系列稀释，再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中，使其均匀分布于平皿中的培养基内，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可换算出样品中的含菌数。 ;三、器材;;　四、操作步骤;2．稀释 　　用1ml无菌吸管精确地吸取1mL原菌悬液放入10-2的三角瓶中，注意吸管尖端不要碰到液面，以免吹出时，容器内液体外溢。然后仍用此吸管将瓶内悬液来回吸吹三次，吸时伸入管底，吹时离开水面，使其混合均匀。另取一支吸管自10-2三角瓶中吸1mL放入10-3试管中，吸吹三次，……其余依次类推。整个稀释过程如图。 ;　3．取样 　　用4支1mL无菌吸管分别精确地吸取10-5、10-6、10-7、10-8的稀释菌液1ml，对号放入编好号的无菌培养皿中。;4．倒平板 　　于上述盛有不同稀释度菌液的培养皿中，倒入溶化后冷却至45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基约10—15mL，置水平位置，迅速旋动混匀，待凝固后，倒置于37℃温室中培养。 ;　5．计数 　　培养24小时后，取出培养皿，算出同一稀释度两个平皿上的菌落平均数，并按下列公式进行计算： 　　每毫