01组织学绪论重点.ppt

组织学与胚胎学Histology and Embryology;第1章;1.概念： 组织学(histology)是研究正常人体 微细结构及其相关功能的科学。 研究内容：细胞、组织、器官与系统 研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子 水平(例：心脏);心脏（左:器官 右:组织光镜图） ;心脏 （心肌细胞光镜像图）; 细胞(cell)是人体形态结构和功能的基本单位，由细胞膜、细胞 质和细胞核构成。  成人约有1014-15个,200余种。;组织(tissue)是由细胞和细胞外基质构成 细胞外基质：由细胞分泌形成。 四种基本组织：上皮组织、结缔组织、 肌组织和神经组织。 几种组织相互有序地组合，具有一定的形态结构 和特定的生理功能构成器官(organ)。 系统(system)由形态结构相似或完全不同、能够 完成某种系列生理功能的器官组成。;二、组织学的研究方法和常用技术 1.光镜(light microscope)技术  光学显微镜分辨率：0.2μm;苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining, HE染色法)： 嗜碱性(basophilia):苏木精为碱性染料,可使细胞核内的染色质和胞质内的核糖体等结构染成紫蓝色, 易被碱性染料着色的性质称为嗜碱性。 嗜酸性(acidophilia):伊红为酸性染料,使细胞质和细胞外基质中的成分染成粉红色,易被酸性染料着色的性质称为嗜酸性。 中性;;;醛复红与偶氮焰红染色，肥大细胞和弹性纤维;2) 几种特殊显微镜术 相差显微镜;2. 电镜技术:用于观察组织细胞的超微结构 分辨率：0.2nm 透射电镜术 (transmission electron microscopy, TEM): 以电子束穿透样品，经聚合放大后显像于荧光屏上进行观察和摄片 戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切 片(50~80nm)→电子染色(醋酸铀、柠檬酸铅) 根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高(黑或深灰色)和电子密度低(浅灰色).;透射电镜图，浆细胞;2) 扫描电镜术（scanning electron microscopy, SEM） 用于观察组织细胞表面立体结构，具有真实的立体感;3.组织化学和细胞化学术 组织化学(histochemistry)和细胞化学(cytochemistry)术是用化学或物理反应原理显示组织或细胞内某种化学成分，并对其进行定位、定量及其相关功能的研究。将该技术应用于游离细胞的样品，则称细胞化学术。;组织化学术: 组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应、并呈现某种颜色,在显微镜下可观察到 糖类：PAS(过碘酸-希夫)反应，显示多糖和糖蛋白， 呈紫红色 过碘酸 糖 醛基 紫红色沉淀 亚硫酸品红复合物 （Schiff试剂，无色）;PAS反应，小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒;酶类:酶与特异性底物的反应产物、再与 捕捉剂反应，形成有色的沉淀物。 脂类:尼罗蓝、苏丹类等脂溶性染料，使 脂类呈相应染料的颜色。 锇酸固定兼染色，呈黑色。 核酸:福尔根反应显示DNA-紫红色； 甲基绿－派若宁反应，同时显示 DNA(蓝绿色)与RNA(红色)。;4.免疫组织化学（immunohistochemistry） 根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织 细胞中的多肽和蛋白质等大分子物质。 用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物 可于显微镜下观察。标记物有荧光素(荧光显 微镜观察)、辣根过氧化物酶(光镜或电镜观 察)、胶体金（多用于电镜观察）。;免疫组织化学原理模式图;免疫组织化学（荧光素标记） 毛细血管内皮细胞呈vWF阳性 ;免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记） 胰岛B细胞呈胰岛素阳性; 免疫组织化学电镜图示上皮细胞膜MAM－6蛋白 （A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记）;5.原位杂交术（in situ hybridization） 即核酸分子杂交组织化