02染色体与DNA重点.ppt

染色体与DNA;染色体;1.2.1染色体的概述;4;1.2.2 真核细胞染色体的组成※;1.2.2.1 染色体中的蛋白质※;7;组蛋白的特性;真核细胞DNA序列大致上可被分为3类;染色质（Chromatin）的基本单位：核小体（Nucleosome）;Core Histones: H2A, H2B, H3 H4;DNA到染色色体的压缩过程;DNA的变性与复性;DNA的增色效应（hyperchromic effect） 加热时，DNA双链解链过程中，内部的碱基暴露，对260nm波长紫外光吸收增加，DNA的A260增加，并与解链程度有一定的比例关系。这种关系称为DNA的增色效应（hyperchromic effect）。 解链曲线 连续加热DNA的过程中以温度对A260的关系作图，所得的曲线。从曲线中可以看出，DNA的变性从开始解链到完全解链，是在一个相当窄的温度内完成的，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50％时的温度称为DNA的解链温度（融解温度）（melting temprature,Tm）。在Tm时，核酸分子内50%的双链结构被解开。一种DNA分子的Tm值的大小与其所含碱基中的G+C比例相关，G+C比例越高，Tm值越高。 Tm值计算公式：Tm＝69.3+0.41（ G+C )% ， ＜20bp的寡核苷酸的Tm计算：Tm＝4（G+C）+2（A+T）。 ;3．ＤＮＡ的复性与分子杂交 DNA复性 变性DNA在适当条件下，分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，又称为退火（annealing）。 DNA的复性速度受到温度的影响，复性时温度缓慢下降才可使其重新配对复性。如加热后，将其迅速冷却至４℃以下，则几乎不可能发生复性。这一特性被用来保持DNA的变性状态，一般认为，比Tm 低25℃的温度是DNA复性的最佳条件。;核酸分子杂交（hybridization） 在DNA复性过程中，如果将不同来源的DNA单链分子放在同一溶液中，或者将DNA和RNA分子放在一起，双链分子的再形成既可以发生在序列完全互补的核酸分子间，也可以发生在那些碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间。 核酸分子探针 用同位素、生物素或荧光染料标记一小段已知序列的多聚核苷酸的末端或全链就可以作为探针，探针的序列如果与DNA或RNA序列互补，就可以探知核酸分子。