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基因工程基本的操作程序（一）姓名_______班级________ 教师寄语：信心就是力量，态度决定一切，习惯铸就成功 知识回顾：1.限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶作用的部位是____________ 2.运载体具备的几个条件？ 知识新授 请回忆必修二中基因操作的基本步骤是什么？看选修三中基本的操作步骤是什么？ 一.目的基因的获取 (1)传统方法：________________________________与________________________________ (2)目的基因主要是_____________________，请至少举三个例子 (3)目前常用方法：______________________、_____________________、________________ 从基因文库中获取目的基因： 概念：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入_______________中储存，各个受体菌分别含有____生物的____基因，称为___________ 种类：______________与_____________（ ） 试举例？ 基因文库的构建模式图 如何从基因文库中获取目的基因？依据：________________________________________ 如：_____________________、___________________________、_______________________ 、______________________、_______________________ 生物技术资料卡补充知识：原核细胞的基因结构 真核细胞的基因结构 思考：编码相同数目氨基酸的蛋白质，原核细胞与真核细胞的基因结构一样长吗？ 利用PCR技术扩增目的基因 ①概念：PCR全称为___________________，是一项在生物________复制___________的核酸合成技术。 ②原理：_______________ ③条件：前提条件：_____________________________ 基本条件：_____________、______________、______________、_____________、_______ ④方式：以______方式扩增，即____(n为扩增循环的次数） ⑤过程：1.DNA变性：加热至________℃ ，目的基因DNA在热的作用下，___键断裂，形成___________ 2.退火：冷却至________ ℃，引物结合到互补DNA链 3.延伸：加热至________℃，______酶从从引物起始引导互补链的合成 ⑥结果：使目的基因在短时间内成百万倍的扩增 ⑦思考：PCR技术与DNA复制的异同点？ 通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成（适用范围：_________________________) 1）反转录法：以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。(用箭头和词语简单表示） 2）根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ： 根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。(用箭头和词语简单表示） 二.基因表达载体的构建 1.在操作步骤中的位置_____________________________ 2.目的：_______________________________________________________________________ 3.基因表达载体的组成：____________________________________________________ 4.启动子：_____________________________________________________ 终止子：_____________________________________________________________ 5.在构建过程中需什么工具？只考虑两两结合，可以产生几种重组DNA分子？ 6.绘一个基因表达载体示意图： . 基因工程基本的操作程序（二）姓名_______班级________ 教师寄语：信心就是力量，态度决定一切，习惯铸就成功 知识回顾： 有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由