子宫内膜缺血在腹腔子宫内膜异位病灶形成中作用和分子机制研究.pdf

子宫内膜缺血在腹腔子宫内膜异位病灶形成中作用及分子机制研究 中文摘要 子宫内膜缺血在腹腔子宫内膜异位病灶形成中作用及分 子机制研究 中文摘要 第一部分 正常非缺血内膜建立小鼠子宫内膜异位症模型 目 的 改良“同种异体腹腔注射正常非缺血子宫内膜”建立小鼠子宫内膜异位症 （Endometriosis, EM）模型，研究影响建模的因素，探讨内膜数量及注射频次对内膜 腹腔种植的影响。 方 法 以8-10周龄的雌性C57BL/6近交系小鼠为模型鼠，对―同种异体腹腔注射内膜法‖ 进行如下改良：取供体鼠正常子宫内膜均匀切成1×1mm大小，将组织块装入20号针 头后进行腹腔注射。研究内容：（1）内膜数量对内膜腹腔种植影响：根据腹腔注射 内膜数量，建模鼠随机分为6组（ n=10）：1片组, 2片组, 4片组, 8片组, 16片组,32片组。 （2）根据内膜注射次数对内膜种植影响：以1片内膜作为单次注射量，注射间期为5 天，根据注射次数分为5组（n=10）：1次组，2次组，3次组，4次组,5次组。建模后 第7天观察病灶，取病灶作HE染色组织学检查。根据肉眼见典型病灶结合组织学检查 内膜腺体为存活病灶。以成模率及内膜存活率作为评价内膜存活情况指标。成模率= 建模成功鼠（只）/各组总建模鼠；内膜存活率=存活内膜总数（片）/ 腹腔注射内膜 总数（片）。 结 果 改良后“腹腔注射内膜法”建立EM模型具有以下优点：改良后内膜残留减少， 异位病灶大小均匀，病灶分散，便于观察，成模率、内膜存活率稳定。 （1）内膜数量对内膜腹腔种植影响：成模率随着注射内膜量增加而逐渐增加，从1 片组20%（2/10）增加到8片组60%（6/10），当内膜数量到达16片以上时成模率达到 100%??10/10）; Pearson相关分析内膜数量与成模率成正相关（R=0.982），呈二次函 I 中文摘要 子宫内膜缺血在腹腔子宫内膜异位病灶形成中作用及分子机制研究 数曲线：Y=1.095+0.863x-0.18x2（R2=0.944，F=33.45，p=0.003）；内膜种植数量与 内膜存活率相关（R=0.947），曲线拟合成二次函数曲线：Y=-1.167+3.72x-0.61x2 （R2=0.972，F=69.127，p=0.001）。卡方检验8片组内膜存活率显著高于其它各组 （p0.05）。 （2）内膜注射次数对内膜腹腔种植的影响：随着内膜注射次数增加，成模率逐 渐增加，由1次组20%（2/10）增至5次组100%（10/10），Pearson相关分析内膜注射 次数与成模率正相关（R=0.981），回归分析成二次函数曲线：Y=1.095+0.863x-0.18x2 （R2=0.944，F=33.45，p=0.003）；内膜存活率与注射次数正相关（R=0.981），曲线 拟合成幂函数曲线：Y=1.99X0.949（R2=0.962，F=88.357，p=0.011）。 结 论 改良后“同种异体腹腔注射非缺血内膜”建立EM模型，病灶分散、病灶大小、数量、 成模率、内膜存活率变异小，模型稳定，重复性好。内膜数量及内膜注射频次是影响 建模的重要因素。大量内膜（大于16片）单次注射以及少量正常内膜（1片）多次注 射成模率高达100%，表明正常非缺血内膜易于在腹膜种植存活。8片单次腹腔注射成 模率“60%”，内膜存活率“40%”，病灶数3-5个，适于进行各种干预试验，是