第十一章动物基因工程重点.ppt

第十一章???动物基因工程;第一节 基因工程概述; ; 基因工程的概念 ○基因工程是一种DNA重组技术,在分子水平上进行遗传操作,按设计的蓝图,从供体中提取或人工合成目的基因,令其与载体构建成重组DNA,再转移到受体细胞,目的基因在细胞中表达获得新的遗传性状 ○基因工程的操作程序:获取目的基因——目的基因与载体构建重组DNA分子——重组DNA分子转移至受体细胞——转化细胞的扩增、鉴定和筛选;第二节????工具酶;限制性内切核酸酶 (restriction enzymes);限制性内切酶分类;限制性酶EcoRI识别位点(粘性末端);EcoRI酶切不同来源的DNA及退火重组;平齐末端(SmaⅠ);限制性内切酶的命名;限制性内切酶的主要用途; 二、DNA聚合酶 (一)DNA聚合酶的类型 ○ 依赖DNA的——DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow)、T4 DNA聚合酶、T7 DNA聚合酶、修饰的T7 DNA聚合酶、Taq DNA聚合酶。 ○ 不依赖DNA的——末端转移酶 ○ 依赖RNA的——反转录酶;DNA聚合酶的特性; 三、DNA连接酶 · 该酶的用途是将带匹配黏端的双链DNA或平端双链DNA片段的5’- P 与另一也带相应缺口的DNA片段的3′ - OH 连接起来 四、甲基

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