蒸发光散射检测器分析.ppt

蒸发光散射检测器(ELSD)在药物分析中的应用;概述;背景;主要内容;第一部分 蒸发光散射检测技术;1.1 蒸发光散射检测器工作原理 ;检测三步曲示意图;1.2 ELSD构造与操作模式;A型蒸发光散射检测器示意图 ;B型蒸发光散射检测器示意图 ;两种操作模式的应用区别;1.3 ELSD的基本特点 ;灵敏度 检测限与定量限 稳定性与重现性 线性;1.3.1 灵敏度 ;ELSD响应曲线;1.3.2 检测限与定量限 ;ELSD响应曲线;1.3.3 稳定性与重现性 ;线性范围是指灵敏度保持不变时样品的最大用量与最小用量之比。反映在检测器响应曲线上就是保持直线线段的样品量变化范围，即检测器输出信号与样品呈线性关系。 ;1.3.4 线性 ;ELSD线性特征;1.3.5 ELSD与其它HPLC检测器的比较 ;1.4 ELSD的应用优势;只需一个标准品就可定量两个或更多的未知品，因此可以通过和内标比较来定量未知化合物。此特性对于组合化学中用组合技术合成??化合物的定量尤其有用。 所选的未知物结构相似而分子量不同，定量准确性更高。 ;UVD：定量未知化合物是很困难的，样品的紫外吸收值往往和代表样品质量的色谱峰大小无关。 ELSD：其响应不依赖于样品的光学特性，代表了样品的组成，检测信号更为直接的代表样品的真实浓度，与样品的质量浓度呈正比，因而能用于测定样品的纯度或检测未知物。 ;ELSD的一些性能指标虽然还不能与某些更成熟HPLC检测器相比，但ELSD的检测原理在某些方面有其独到之处 。 认真分析ELSD的有关特点，合理运用，将不利因素的影响降低到最低程度，提高准确度、精密度和重现性。 ;第二部分 ELSD的响应特性;2.1 通用性;散射光的响应值与粒子质量的关系： I＝kmb 取对数： lgI＝blgm＋lgk m：待测组分的粒子质量和 I： 待测组分所产生的散射光光强 k,b：常数;验证：分别精密称取基准氯化钠、麦迪霉素、雷帕霉素、头孢硫眯、妥布霉素适量，溶解并稀释至不同的浓度后，采用离柱分析，进样后，记录其色谱行为，以峰面积对样品量作出各种物质在ELSD中的响应曲线。;2.1通用性－响应值与物质结构;2.1通用性－响应值与物质结构;通用性－物质结构对响应值的贡献;R=H，为头孢氨苄；R=OH，为头孢羟氨苄 ; R=H，为氨苄西林；R=OH，为阿莫西林 ;通用性－物质结构对响应值的贡献;通用性－物质结构对响应值的贡献;羟基引入，分子极性增强，ELSD响应值增加；分子极性对ELSD影响较大 。 ;头孢拉定;通用性－物质结构对响应值的贡献;通用性－物质结构对响应值的贡献;通用性－物质结构对响应值的贡献; Ceftezole, R=H cefazolin, R=CH3;通用性－物质结构对响应值的贡献;西林中的五元N、S杂环变为头孢中的六元环，引起ELSD响应值大幅度增加。 其原因可能涉及原子排布变化，引起分子极性分布和分子体积变化有关，这些因素也可能影响分子的聚集和所形成颗粒的大小。 ;2.1 通用性;2.2 响应因子一致性;氨基糖甙类抗生素 大环内酯类抗生素 四环类抗生素 喹诺酮类抗生素 β-内酰胺类抗生素;响应因子一致性－大环内酯类;响应因子一致性－大环内酯类;响应因子一致性－大环内酯类;盐酸四环素 土霉素 盐酸美他环素; 四环素 R1=CH3OH R2=H 土霉素 R1=CH3OH R2=OH 美他环素 R1=CH2 R2=OH;响应因子一致性－四环类抗生素;响应因子一致性－四环类抗生素;阿米卡星（丁胺卡那霉素） 西索米星 奈替米星 依替米星 威替米星;名称;阿米卡星;响应因子一致性－氨基糖苷类;;校正线性方程： Amikacin： y=1.46x+5.07，r=0.9997 Sisomicin： y=1.51x+5.03，r=0.9997 Netilmicin： y=1.52x+4.88，r=1.0000 Etimicin： y=1.46x+4.85，r=0.9999 Vertilmicin： y=1.41x+4.90，r=0.9998 斜率的RSD＝2.92%;响应因子一致性－氨基糖苷类;依诺沙星（Enoxacin） 左氧氟沙星（Levofloxacin） 环丙沙星（Ciprofloxacin） 洛美沙星（Lomefloxacin） 加替沙星（Gatifloxacin）; 依诺沙星 左氧氟沙星 ; 环丙沙星