杨梅黄铜抑制人体间充干细胞分化分析.ppt

Myricetin Inhibits Adipogenesis in Human Adipose Tissue-derived Mesenchymal Stem Cells 姓名 陈珺 学号 30 内容 简介 研究目的意义 试验方法 结果与分析 结论 简介 间充质干细胞 间充质干细胞（mesenchymal?stem?cells,MSC），是一种具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞。这种干细胞能够发育成硬骨、软骨、脂肪和其他类型的细胞。 研究目的意义 虽然杨梅黄酮对细胞有很多功能效果，但是不知道杨梅素对干细胞分化是否有作用。在这项研究中，在这项研究中，我们对人体脂肪间充质干细胞（hAMSCs）到杨梅素（1-30μM）期间成脂分化，以确定调节杨梅素对hAMSCs的脂肪分化的影响。 试验方法 1、细胞培养 试验方法 2、脂肪诱导 间充质干细胞生长至汇合前诱导分化。成脂分化诱导培养hAMSCs14天中脂肪诱导培养基。经6天后，将细胞培养于只含有10％FBS和在α-MEM培养基1mM的胰岛素，并且其目的是每3天更换一次。 试验方法 3、油红染色 原理：利用染料易溶于脂质的性质，证明组织脂肪含量的多少。脂肪是呈红色的 试验方法 4、MTT法 （测定杨梅素抑制脂肪生长量） MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法 。 使用酶标仪在540／720nm波长处测得吸光度值，这个可以间接反映出活细胞数量。 试验方法 5、RNA提取和实时定量荧光PCR （测定脂肪细胞分化的影响） PCR的条件是在95℃下10min热启动，随后15s45个循环，60℃10s，72℃30s的条件下进行。每个mRNA和正常的对比后发现违反了RPLP（酸性核糖体磷蛋白大亚基)基因表达水平。此实验重复两次。 结果与分析 1、杨梅素对hAMSC生存能力的影响 结果与分析 2、杨梅素对脂肪形成的影响 结果与分析 2、杨梅素对甘油三酯在人类脂肪细胞间充干细胞的影响 结果与分析 3、杨梅素减少脂肪细胞特异性基因表达 结果与分析 3、杨梅素减少脂肪细胞特异性基因表达 结论 研究结果表明，⑴杨梅黄酮抑制脂肪细胞分化 ，在脂肪细胞分化中，表达和修饰PPAR-γ基因，主脂肪形成的转录因子，发挥关键作用。⑵降低脂质液滴的数量的结果表明杨梅素抑制hAMSCs成脂分化。此外，这些结果提供了一种新的对hAMSC分化，此结果不仅更深入地了解杨梅素对脂肪分化的影响，而且对调控干细胞分化有一定影响。此外，理解杨梅素对脂肪细胞分化的机制将是有益的设计新的策略来预防目前流行的肥胖使用杨梅素的水平。进一步的研究将是需要揭示杨梅素对干细胞的影响分化。 * * 杨梅黄酮是一个在各种食物，包括葱内发现的主要类黄酮，浆果，葡萄，红酒。大量的研究已经表明，杨梅黄酮具有抗氧化，抗炎，和抗癌作用。然而，虽然杨梅素的各种功能已得到很好的研究中体内，的影响在脂肪干细胞分化杨梅素仍下落不明。