现代生化仪器分析
电泳技术
电泳的基本原理
电泳是在电场的作用下而产生的物质运动,不同的物质在一定的电场强度下,由于所带电荷不同,因此受到的引力不同,向相反电极泳动速度不同进而达到分离目的。
在一定pH条件下,每一种分子都具有特定的电荷(种类和数量)、大小和形状,在一定时间内它们在相同电场中泳动速度不同,各自集中到特定的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原理。
电泳的分类
显微电泳
等电聚焦电泳
等速电泳
密度梯度电泳
电泳
自由电泳
(无支持体)
区带电泳
(有支持体)
滤纸电泳(常压及高压)
薄层电泳(薄膜及薄板)
凝胶电泳(琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶)
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种电泳方法。聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好,有弹性,透明,化学性质稳定,对pH和温度变化小,没有吸附和电渗作用小的特点,是一种很好的电泳支持介质。
聚丙烯酰胺凝胶电泳按原理和操作形式的不同,主要有不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和双向电泳等类型。
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳
系统的不连续性表现在以下几个方面:
凝胶由上、下两层凝胶组成,两层凝胶的孔径不同,上层为大孔径的浓缩胶,下层为小孔径的分离胶。
缓冲液离子组成及各层凝胶的pH不同。电极缓
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