医院感染监控中常用检测方法.docVIP

医院感染监控中常用的检测方法采样及检查原则： 采样后必须尽快对标本进行相应指标的检测，送检时间不得超过6 h；若标本4 ?℃保存时，送检时间可延长，但不得超过24 h。? 1．医务人员手的微生物学监测（1）采样时间： 在接触患者或从事医疗活动前进行采样。（2）采样面积及方法： 被检人五指并拢，将浸有无菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子一支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米cm2) 计算。（3）细菌菌落总数检查： 1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放35℃温箱内培养24~48 h计数菌落。手细菌菌落总数（cfu/ cm2）= ?平板上菌落数×采样液稀释倍数30×2（4） 判断标准： 见表6-3-1。? ?2．物体表面的微生物学监测（1）采样时间：消毒处理后4 h内采样。（2）采样面积： 被采表面100 cm2， 取全部表面；被采表面≥100 cm2，取100 cm2。（3）采样方法： 用5cm×5 cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有灭菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样式1～4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子入装10ml采样液的试管内送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。（4）细菌菌落总数检查： 1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放35℃温箱内培养24~48 h计数菌落。物体表面细菌菌落总数（cfu/ cm2）= ? ? 平板上菌落数×采样液稀释倍数采样面积（cm2）（5）判断标准：见表6-3-1。3．空气的微生物学监测（1） 采样时间： 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。（2） 采样高度： 与地面垂直高度80～150 cm。（3） 布点方法： 室内面积≤30 m2，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端各距墙1m处取一点；室内面积30 m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。（4） 采样方法： 用90mm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5~30 min后送检培养。（5）细菌菌落总数检查：将平板置37℃温箱内培养24 h计数菌落。空气细菌菌落总数（cfu/ m3）= 50000NAT? ?式中：A—平板面积 （cm2）T—平板暴露时间 （min）N—平均菌落数 （cfu/平板）（6） 判断标准：见表6-3-1。4．使用中消毒剂和无菌器械保存液的微生物学监测?（1） 采样时间： 采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。（2 ） 采样量及方法： 在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入到9ml稀释液中混匀。醇类和酚类消毒剂用普通营养肉汤作稀释液。含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒液需在肉汤内加入0.1%硫代硫酸钠作稀释液。季铵盐类消毒液需在肉汤中加入3% Tween 80和0.3％卵磷脂作稀释液。含有表面活性剂的各种复方消毒剂需在肉汤中加入3％Tween 80作稀释液。常用消毒剂的中和剂见表6-3-2。? ?(3) 细菌菌落总数检查：分别取1ml采样液放入2只灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，将其中一只平板置20℃培养7d,观察真菌生长情况；另一平板放37℃温箱内培养72 h计数菌落。 平板上有菌生长，证明被检样液有残存活菌，若每个平板菌落数在10个以下，仍可用于消毒处理（但不能用于灭菌）；若每个平板菌落数超过10个，说明每毫升被检样液含菌量已超过100个，不宜再用。? ?（4）判断标准：使用中消毒剂，细菌菌落总数≤100 cfu/ ml，病原微生物不得检出；无菌器械保存液必须无菌。5．医疗用品的微生物学监测（1）采样时间：在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。（2）采样量及采样方法：可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》2000年版二部附录中“无菌检查法”规定执行。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面100 cm2，取全部表面；被采表面≥100 cm2，取100 cm2。（3）无菌检查：参照《中华人民共和国药典》2000年版二部附录中“无菌检查法”。（4）细菌菌落总数检查：1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放37℃温箱内培养24~48 h计数菌落。物体表面细菌菌落总数（cfu/ cm2）= ?平板上菌落数×采样液稀释倍数×采样面积（cm2）?（5）判断标准：进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须