榄香烯对肝癌细胞株中抑癌基因甲基化影响实验的研究.pdfVIP

榄香烯对肝癌细胞株中抑癌基因甲基化影响的实验研究 中文摘要 榄香烯对肝癌细胞株中抑癌基因甲基化影响的实验研究 中文摘要 目的：研究榄香烯对肝癌细胞株HepG2 和QGY7703 细胞增殖、凋亡、周期的影 响，明确榄香烯对两种肝癌细胞抗肿瘤作用；检测榄香烯处理前后的两种细胞中抑癌 基因GSTP1、RIZ1 、HAI-2 、SLIT2 甲基化状态，探讨榄香烯是否具有逆转异常甲基 化作用，并以期筛选出具有肝癌特异性的抑癌基因。 方法：采用不同浓度的榄香烯处理肝癌细胞株HepG2 和QGY7703 细胞，用MTT 法检测榄香烯对两种细胞抑制增殖的作用，流式细胞术检测榄香烯诱导细胞凋亡的作 用及对细胞周期的影响，用 MSP 法检测榄香烯对处理前后的两种细胞中抑癌基因 GSTP1、RIZ1 、HAI-2 、SLIT2 甲基化的影响。 结果：不同浓度的榄香烯作用肝癌细胞株HepG2 和QGY7703 细胞48h 后，显示 出对两种肝癌细胞明显抑制增殖作用，对两种肝癌细胞的 IC50 分别为（69 ± 6.3 ） μg/ml 和（63 ± 2.1 ）μg/ml；与对照组比较差异有统计学意义 （P 0.05 ）；两种肝癌 细胞未经榄香烯处理时自然凋亡率分别为（6.37 ±0.15 ）%和 （7.40 ±0.66 ）%，榄 香烯在10、20 、30μg/ml 浓度下对两种肝癌细胞的凋亡率分别为（20.83 ±0.25 ）%和 （12.50±0.61 ）%、（27.7 ±0.75 ）%和 （32.77 ±2.30 ）%、（37.1 ±0.46 ）%和 （48.27 ±1.23）%，各组间差异有明显统计学意义（P 0.05 ）；在10、20 、30μg/ml 浓度下， 榄香烯能使两种肝癌细胞阻滞于 S 期，G1 期细胞百分比分别由（68.71 ±0.69 ）%和 （65.56 ±0.41 ）%下降到（60.81 ±0.38 ）%和 （53.00 ±0.15 ）%，S 期细胞百分比分 别由（28.85 ±0.18 ）%和（27.04 ±0.45 ）%增加到（36.81 ±0.36 ）%和（38.43 ±0.60 ）%， 与对照组比较差异均有统计学意义 （P 0.05 ）；GSTP1、RIZ1 、HAI-2 基因在肝癌细 胞株HepG2 和QGY7703 两种细胞中均呈完全甲基化表达，SLIT2 基因呈部分甲基化 表达，其中经过浓度 40μg/ml 和 160μg/ml 榄香烯和 5-Aza-dc 处理，GSTP1 基因在 QGY7703 细胞中出现了未甲基化状态。 结论： 1.榄香烯对肝癌细胞株HepG2 和QGY7703 细胞有明显的抑制增殖作用，诱导其 I 中文摘要 榄香烯对肝癌细胞株中抑癌基因甲基化影响的实验研究 凋亡，并且阻滞两种肝癌细胞从S 期进入G /M 期，呈浓度依赖性。 2 2.榄香烯具有逆转抑癌基因异常甲基化作用，但具有基因和细胞特异性。 3. GSTP1、RIZ1 、HAI-2 基因甲基化状态具有很好的肝癌特异性，可建立甲基化 谱，可较好的区分肝癌与非肝癌。 关键词：榄香烯；抑癌基因；甲基化 研究生：黄洪军 指导老师：江勇 II Experimental study of elemene on methylation of tumor suppressor genes in hepatocellular carcinoma cell lines Abstract Experimental study of elemene on methylation of tumor suppressor genes in hepatocellular carcinoma cell lines Abstract Objective: To study the effect of elemene on the proliferation, apoptosis and cell cycle of HepG2 and QGY7703 cells, To certain anti-tumor effect of elemene; To investigate the promoter methylation status of GSTP1, RIZ1, SLIT2, HAI-2 in elemene group and control group of hepatocellular carcinoma cells, explore whether elemene can reverse the hypermethyla