32《体外受精和早期胚胎培养》要点.ppt

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3.2 体外受精和早期胚胎培养 专题3《胚胎工程》 试管动物技术 1、概念: 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。 一、体外受精 一、体外受精 2、步骤 一、体外受精 一、体外受精 三、体外受精技术的应用 以牛的体外受精技术水平最高 使牛体外受精胚胎的工厂化生产成为可能 * 1、从试管牛说起 我国 每头奶牛年均产量:3000kg左右, 蒙古黄牛的平均体重:300kg。 国际 每头奶牛年均产量:10000kg左右, 海福特牛体重:800kg。 引进优良品种:每头3~5万元。 快速大量繁殖 ? 牛生育率低,但母牛体内卵母细胞数目多。 母牛 精子数多。 体外受精 快速繁殖动物的优良品种 2、目的: 以试管牛为例 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和 。 一、体外受精: 1、概念: 采取雌性动物卵细胞的和雄性动物的精子,使其在试管中受精。 注:但发育的主要场所是母体 体外受精 早期胚胎培养 2、步骤: (1)、卵母细胞的采集和培养 (2)、精子的采集和培养 (3)、受精 (1)卵母细胞的采集和培养 1、 对实验动物:小鼠、兔和家畜、猪、羊等; 用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子,再从输卵管中冲取卵子(超数排卵) 2、对于大家畜或大型动物:如牛 ①已屠宰母畜的卵巢→卵母细胞; ②活体动物卵巢→超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜→卵母细胞。(活体采卵) 卵母细胞体外培养成熟后再受精。 (1)卵母细胞的采集和培养 (2)精子的采集和获能 (1)采集的方法: 假阴道法,手握法和电刺激法等 (2)精子的采集和获能 假阴道法 假台畜 利用仿生学原理,模仿发情 雌性动物阴道环境。 同时配活台畜或假台畜,并收集。 手握法(适用于 猪、犬等体型较小, 易于控制的家畜 电刺激法 动物麻醉后, 用特制电极伸入动物 直肠,直接刺激位于 腰荐部的射精中枢, 引起射精。 用于野生、经济动物。 (2)精子的采集和获能 一、体外受精 (2)精子获能: 培养法 化学诱导法 啮齿动物、家兔、猪等: 将精子放入人工配制的获能液中 牛、羊等: 将精子放在一定浓度的肝素或 钙离子载体A23187溶液中。 3.受精 获能的精子和培养成熟的卵子,在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 二、胚胎的早期培养 体外受精后,将受精卵移入发育 培养液中继续培养,检查受精状 况和发育能力。 哺乳动物胚胎培养液成分: 无机盐、有机盐、维生素、激素、 氨基酸、核苷酸、血清等。 胚胎发育到适宜阶段时,取出 向受体移植或冷冻保存。 *

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