单克隆抗体药物的临床前研发要点.pptx

单克隆抗体药物的临床前研发 背景知识 大分子药物——生物制药 始于1982年用重组DNA技术进行生物合成的人胰岛素(rHI) www.51pp 51ppt模板网 搜集整理 举例 激素 (胰岛素，胰高血糖素，生长激素) 造血生长因子(Erythropoietin, colony stimulating factors) 干扰素 (Interferons-α, -β, -γ) 白介素 (Interleukin-2) 疫苗 (Hepatitis B surface antigen) 肿瘤坏死因子 治疗用酶 单克隆抗体 来源于细菌、酵母、昆虫、植物和哺乳动物细胞等各种表达体系 研发流程 靶点的发现与选择 单克隆抗体的制备 药效筛选 药动评价 临床试验 靶点的发现和选择 集中在细胞死亡通路、血管生成、细胞周期调控信号转导等方面 例如： CD20 :表达于B细胞和成熟B细胞，调节B细胞增殖、分化；在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达 抗CD20单抗可用于治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤 单抗药物工作机理： 抗体依赖性细胞介导的毒作用( antibody dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC) 补体依赖性细胞毒作用( complement dependent cytotoxicity, CDC) 中和细胞因子 单抗药物作用机理 经典靶点 靶点 表达细胞 抗体药 商品名 厂家 CD20 Daudi,raji,RPMI-8226 利妥昔单抗（Rituximab） 美罗华（Rituxan） 罗氏 Her2 MDA-MB-231,MCF-7,SK-OV-3 曲妥珠单抗（Trasduzumab） 赫赛汀（Herceptin） 罗氏 EGFR A431,A549 西妥昔单抗（Cetuximab） 爱必妥（Erbitux） 默克－雪兰诺 TNFα CHO-DG44-tnfα 阿达木单抗（Adalimumab） 修美乐（Humira） 雅培 VEGF HUVEC 贝伐珠单抗（Bevacizumab） 阿瓦斯汀（Avastin） 罗氏 单克隆抗体的制备 抗体的人源化 嵌合抗体：应用DNA 重组技 术将小鼠抗体基因上的可变区与人抗体基因的恒定区重组, 再将重组后的基因导入骨髓瘤细胞中表达 CDR 移植抗体（改型抗体）：进一步用人的编码构架区( FR) 替代鼠FR, 形成更为完全的人源化抗体, 即除了3 个CDR 是鼠源的外, 其余全部是人源结构 完全人源化抗体：1、噬菌体抗体库技术；2、转基因小鼠技术 药效筛选 特异性与亲和力鉴定：ELISA, WB, FACS, IHC, IP 等 功能鉴定： ADCC, CDC, 中和细胞因子 by抗体生产部门 by药效部门 ADCC—LDH release Herceptin (control) log(agonist) vs. response -- Variable slope (four parameters) Best-fit values Bottom 0.6537 Top 31.88 LogEC50 -2.545 HillSlope 1.118 EC50,μg/ml 0.002854 药效筛选 CDC--CTG Rituxan log(agonist) vs. response -- Variable slope (four parameters) Best-fit values Bottom 6.625 Top 100.1 LogEC50 -0.5091 HillSlope 3.069 EC50, μg/ml 0.3096 药效筛选 cell proliferation and antibody neutralization VEGF Best-fit values Bottom 117.7 Top 526.2 LogEC50 0.6934 HillSlope 1.875 EC50,ng/ml 4.936 Span 408.6 Avastin Bottom 25.7 Top 101.1 LogEC50 -1.386 HillSlope -1.8 EC50,ng/ml 0.04107 Span 75.4 药效筛选 评估ADA是否会影响药效 药动评价 Pharmacokinetics, PK Anti-drug antibodies, AD