第13章转录第二部分要点.ppt

二、真核生物的转录 1.染色质和核小体结构对转录有深刻的影响 2.真核细胞RNA聚合酶高度分工 3.启动子以外的序列（顺式作用元件）参与调节基因的转录 4.转录还需要许多被称为转录因子的蛋白质的参与 5.转录与翻译不存在偶联关系 6.转录的产物多为单顺反子，而原核基因的转录产物多为多顺反子 （一）真核生物的转录系统的特点 结构基因 -GCGC---CAAT---TATA （二）顺式作用元件 顺式作用元件：同一DNA分子中具有转录调节功能的特异DNA序列。包括启动子，增强子、沉默子和调控元件等。 真核细胞RNA polⅡ启动子性质 增强子和沉默子 增强子（enhancer）：是一种能够大幅度增强基因转录效率的顺式作用元件。 沉默子（silencer）：与增强子相反，是一种阻止基因表达的顺式作用元件。 作用特性：与启动子不同，其作用与距离、方向和位置均无关；对临近的基因作用最强；某些增强子或沉默子具有组织特异性。 增强子和沉默子的作用特性 增强子作用的环出模型 （三）转录因子（transcript factor,TF） 反式作用因子：是能直接或间接地识别或结合各种顺式作用元件，参与调控基因转录的蛋白质。顺式作用元件必须由反式作用因子与之结合后才能对转录起调控作用。 转录因子：真核RNA聚合酶不能识别DNA上的启动子，识别这些启动子序列的反式作用因子称为转录因子。 转录因子在转录中主要有两大基本功能：一是作为装配因子或定向因子识别和结合核心启动子，招募RNA聚合酶正确地与启动子结合；其次是调节RNA聚合酶的活性 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ TF Ⅱ H 57 （ a ） （ ） TF Ⅱ E 与RNA-polⅡ结合，解螺旋酶 30 ， 74 TF Ⅱ F 促进 RNA - pol Ⅱ 结合及作 为其他因子结合的桥梁 33 TF Ⅱ B 稳定TFⅡD与启动子的结合 12 ， 19 ， 35 TF Ⅱ A 辅助 TBP - DNA 结合 TAF** 结合 TATA 盒 TBP* 38 TF Ⅱ D 功 能 亚基组成，分子量 ( kD ) 转录因子 ATPase,解螺旋酶和CTD激酶活性 促进启动子的解链和清空 TF Ⅱ H 与RNA-polⅡ结合，协助招募TFⅡH， 激活TFⅡH，促进启动子解链 57 （ a ） TF Ⅱ E 30 ， 74 TF Ⅱ F 促进 RNA - pol 结合及作 为其他因子结合的桥梁 33 TF Ⅱ B 12 ， 19 ， 35 TF Ⅱ A 辅助 - DNA 结合 TAF** 结合 TATA 盒 TBP* 38 TF Ⅱ D 功 能 亚基组成，分子量 ( kD ) 转录因子 b 34 （四）真核生物 RNA聚合酶II 所负责的基因转录过程 1. 转录起始 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 转录起始前复合物(pre-initiation complex, PIC)：真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子 。 TFⅡF ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 转录预起始复合物的形成 转录起始复合物的形成——CTD的磷酸化 P P P P ATP 启动子清空 POL II CTD P P P P NTPs mRNA前体 转录延伸因子 模板理论(piecing theory) 一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间互相结合，生成有活性，有专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。 （二）转录延长 转录因子TFⅡS参与延伸 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 RNA-Pol RNA-Pol RNA-Pol 核小体 转录延长中的核小体移位 转录方向 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA —— 和转录后修饰密切相关。 （三）转录终止-3’末端的产生和多聚腺苷酸化 转录后加工 Post-transcriptional Processing 第三节 一、真核生物mRNA的转录后加