分子遗传学第七章遗传变异的机理2——重组要点.pptVIP

第七章  遗传变异的机理II 重组 第一节 一般同源重组同源DNA序列之间的重组称为一般重组。重组的过程要经历一个DNA断裂和重接的过程。 一、重组的Holliday模型 11-18 二、重组过程中的酶 一般性重组中涉及到三个重组基因的作用：recA，recB，recC。另外还要单链结合蛋白SSB的作用。 由recB，C基因编码的蛋白质复合体使DNA双链的一条链打开缺口，并使螺旋部分松开。SSB结合到单链区使之稳定，recA的蛋白也能结合到单链上，引导双链形成，使原双链中相应的单链被置换。交叉的移动由ATP水解来推动。切口由连接酶封口。 Homologous DNA Strand nicking exchange Ligate nicked strands go on Cross strand exchange structure 重组过程的步骤和酶：(a) 一对同源双链；(b)由recB，C核酸酶在第一对DNA双链的一条链打开缺口，并使螺旋部分松开。SSB结合到单链区使之稳定，recA的蛋白也能结合到单链上，引导双链形成，使原双链中相应的单链被置换；(c)另一对DNA双链的一条链打开缺口并与第一对DNA双链的一条链配对；(d) 切口由连接酶封口；(e) 开始180o旋转的结构 (a) (b) (c) (d) (e) 第二节 专一性重组 专一性重组指只发生在特定位置上的重组。 一、噬菌体的整合作用 λ噬菌体的整合和切割酶能专一性地识别λDNA和E.coli染色体上的特定位点，使λ与宿主染色体之间发生重组 λ整合切割酶特异切割POP’和BOB’后，能在O区产生一个粘性末端，在λ整合酶的作用和宿主整合因子的参与下，λDNA整合进E.coli的染色体中， 为专一性重组。 BOP, POB, gal 整合和切割酶 λ整合酶，宿主整合因子 λ BOB, gal bio POP, POP, λ Packaging Injection E.coli DNA attB attP E.coli 重组位点 λ重组位点 λDNA λ整合和切割酶 λ噬菌体 的整合作用 G C T T T T T T A T A C T A A C G A AA AA A T A T GA T T P B P, B, Att的核心区O λ整合切割酶特异切割POP’和BOB’后，能在O区产生一个粘性末端，在λ整合酶的作用和宿主整合因子的参与下λDNA整合进E.coli的染色体中 λ整合切割酶 λ整合切割酶 二、对基因表达具调控作用的重组 利用位置特异性重组控制基因表达：沙门氏菌的相转变：表面鞭毛有H1和H2型。 由于反向重复区的重组会导致插入序列的翻转。翻转重组的过程大约1次/1000次分裂。由此造成H2和H1基因交替表达，使H1和H2两种表面鞭毛相转变的频率很高。 P IR(L) IR(R) hin H2 rH1 H2 鞭毛 H1阻遏物 P H1 HIN H2 rH1 P P P hin H2 rH1 HIN 蛋白 H1 H1 鞭毛 P 反向重复区的重组会导致插入序列的翻转由此造成H2和H1基因交替表达。 三、一般重组与专一性重组的区别 插入式重组：λ噬菌体整合到宿主染色体上和沙门氏菌控制鞭毛形态的正反方向插入重组涉及遗传因子的加入。 替换式重组：一般性重组中两个染色体交换了一部分。 区别： 1．DNA同源部位的大小：λDNA和E.coli DNA只有附着点alt的核心区O是同源的，而在一般重组中，两个染色体是同源的 2．重组部位的大小：一般重组中，虽然整个染色体同源，但实际重组部位可大可小，而特异重组中，同源部位虽很小，但重组一律包括整个λDNA。 第十八章 遗传变异机理III  转位因子 上世纪三十年代，玉米遗传学家 Barbara McClintock在研究中发现了玉米籽粒色斑不稳定遗传的现象，可能是一种可转移的遗传因子。 1948年McClintock首先确认和提出了转座子的概念，这一重大发现并未引起人们的重视，70年代后在原核和真核生物中不断发现有转位因子. McClintock（1902-1992）： 1944：美国国家科学院院士 1945：美国遗传学会主席 1983：Nobel Prize ，35年后将转位因子的重大发现归功于她  转位因子的概念： 转位因子：调控因子，跳跃基因，徘徊基因，运动基因，转座子等。（transposable elements） 能从同一染色体