血流感染标本和呼吸道标本操作规范及临床意义
广东省中医院大学城医院检验科 张伟铮
标本类型
血培养
呼吸道标本 (痰标本、咽部标本)
尿培养
脑脊液培养
生殖道标本培养
抽吸物和组织标本的培养(需氧、厌氧培养)
伤口拭子
粪便培养
血培养概念
采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室培养检测.
检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在.
如有细菌,则极有可能为致病的细菌.
进一步进行鉴定/药敏试验.
完整的血培养过程
医师开出医嘱
护理人员收集送检样本
实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的微生物
三级报告:为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果
目前血培养的问题
采血时机不合适
采血套数不够
采血量不足
只做需氧培养,不同时做厌氧培养
采血前或采血时正在使用抗生素治疗
血流感染与血培养
的规范实践
————关于血培养指征
“只有在发热时,才需要进行血培养。”
想采就采
血培养的指征
当怀疑血流感染或脓毒症时,应常规行血培养。
怀疑患者有血流感染的症状有:
不明原因的发烧(>38℃)或体温过低(<36℃)
白细胞增多( >10,000/ul),粒细胞减少( <1,000/ul)
休克,寒颤,僵直
严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,腹部术后感染,…)
心率异常加快
低血压或高血压
呼吸频率加快
———关于采血时机
“何时采血进行血培养,无特殊时间要求。”
———关于采血套数及部位
“为减轻患者痛苦,只从一个穿刺部位采一份血液标本即可。”
血培养采血时机
细菌浓度
体温
0
30
60
时间 (分钟)
基本概念
成人“一套” 血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个,也叫“一份”
注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套应从另一个穿刺点获得。
儿童一般只做需氧培养,但仍需从多个部位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。
采血套数
Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many
BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548
表皮葡萄球菌的临床意义
采集1套无法判断是病原菌还是污染菌。
2-3套血培养,有助于污染的判断。
关于血培养套数与采血部位
每位患者每次采血最少2套,3套更好
初发患者,绝不能只采1套标本
多个穿刺部位采血。因多部位同时发生污染的几率较小,便于对结果进判断
——— 关于采血间隔
“两套血培养采集间隔无特殊要求。”
关于标本采集间隔时间
对于非持续性菌血症,同时或短时间内采集2-3套血培养,因为体内巨噬细胞吞噬系统会在15~30min内清除掉进入人体内的细菌。
可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养,30分钟内完成3套血培养的采集,采集后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。
可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1h采集1套,连续采集3套标本。如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。
——— 关于采血量
“每瓶采集多少血液无特殊要求。”
采血量(ml)与检出率的关系
血培养物每增加一毫升,真性菌血症
成年人微生物的检出率增加3%
但并非越多越好,超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤,使肉汤无法有效中和血中的抑制物质(补体、抗体、抗生素)。所以血液与肉汤的最佳比例为1:4-1:10
关于采集血液量
采血量是影响灵敏度最关键因素
成人一份标本2个培养瓶(需氧+厌氧),每瓶8-10ml,共20ml;要求至少采两份标本,即40ml。
儿童一般只需采集需氧瓶,在保证采集血量<1%总血量下,一般为1-3ml
采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床90%以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染
———关于各种血液标本的采集顺序
先采生化、凝血标本,再采血培养标本。”
采各种血液标本的先后顺序
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。
所以要最先采集血培养标本。
污染率的指标是 3%(100份标本里只能有不到3个标本出现污染)。
———关于皮肤及培养瓶消毒
“消毒的重点是足够量的消毒剂。”
皮肤消毒程序:
推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。
碘町作用1min
碘伏作用1.5-2min
洗必泰作用时间与碘町一样(但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒)
培养瓶的消毒程序:
去掉培养瓶口的塑料瓶盖。
75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。
自然待干。
将标本注入培养瓶内。
5.颠倒混匀标本与肉汤,以避免血液凝集。
———关于培
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