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* * 实验一 显微镜的构造和使用 植物细胞(一)?一、目的要求1、了解显微镜的构造及其维护;2、初步掌握显微镜的使用方法;3、了解植物细胞的基本结构;4、学习临时装片方法。 ?二、实验用品和材料用品(以后各次实验基本相同):显微镜、扩大镜、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、纱布、吸水纸、蒸馏水、番红、醋酸洋红、碘液、45%醋酸、结晶紫。实验报告纸及绘图工具自备。材料:洋葱鳞片叶、黑藻、红辣椒、大白菜? 三、实验内容1、显微镜的构造及使用方法(1)按号把自己的显微镜取出,放在实验桌上,参照本实验指导第二节“显微镜”,在教师指导下熟悉显微镜各部分构造的名称及用途,然后进行操作练习,先用低倍物镜进行对光练习,使视野调节得明亮而均匀,再转换成高倍物镜,此时注意它的视野亮度与低倍物镜有无区别?思考:通过哪几方面的调节操作可使高倍物镜的视野达到要求的亮度? (2)取一永久制片,按照“低倍镜使用”的步骤与方法进行操作练习。注意:要使标本向前移动时,载玻片应向哪个方向移动?要使标本向左移动时,载玻片应向哪个方向移动?经多次练习掌握移动玻片使物象保持视野中央的规律。应该注意,拧动移动器时、动作要轻,只能慢慢移动,切忌动作过猛,防止损坏移动器。观察时,不要闭眼,应练习自己用左眼观察单筒显微镜的习惯(右眼便于绘图)。 (3)结合观察洋葱表皮细胞,进行显微镜操作练习。观察完毕,按正常要求取下玻片标本,检查各种零件的编号,把显微镜收藏好(按编号顺序放入柜中,不要放错地方)。? 2、洋葱鳞片叶表皮细胞结构的观察(1)先把载玻片、盖玻片擦干净,在载玻片中央滴一滴碘液(参看第二节“临时装片法”,照其方法进行操作)。(2)取洋葱头新鲜的肉质鳞片,用镊子从其内表面撕下一条透明的、薄膜状的内表皮,再用剪刀剪取3-5平方毫米的一小块,迅速置于载玻片上的水滴中,注意,必须外切向壁朝上,如果发生卷曲,应细心地用镊子和解剖针将其展开,再盖上盖玻片(盖盖玻片时,用镊子轻轻地夹住盖玻片一侧,先放下相对的一边,然后再慢慢地将整个盖玻片放下,以防产生气泡)。 检查一下,如果载玻片上水液过多,盖玻片在水上浮动,应用吸水纸吸去一些水分;水液过少的话则可在盖玻片一侧用滴管加入适量水分,使整个盖玻片下充满水液,装片次数多了,应该根据盖玻片的大小掌握好加水的分量,做到一次准确。 (3)将装片置显微镜下观察,可看到表皮由许多方形“小格子”组成,每个小格子就是一个细胞,再换用高倍物镜,观察一个典型的细胞结构,区别下列部分。细胞壁:包围在细胞的原生质体的外面,比较透明,因此只能看到细胞的侧壁。初看时,好象两个相邻的细胞只有一层壁,但是调节细调焦螺旋和虹彩光圈时,就能发现这层细胞壁实际上是三层,即两侧为相邻两个细胞壁,中间是粘连两个细胞的中胶层(胞间层)。 细胞质:为无色透明的胶状物,紧贴在细胞壁以内,被中央大液泡挤成一薄层,仅细胞的两端较明显,当缩小光圈使视野变暗时,在细胞质中可以看见一些无色发亮的小颗粒,是白色体。 细胞核:为扁圆形的小球体,总是沉没在细胞质中,由于有中央大液泡的形成,所以使它和细胞质一样紧贴着胞壁。有的细胞核贴近细胞的侧壁,只能看到某侧面,而不少的细胞核则紧贴上面和下面的细胞壁,就可以看到它的宽面,此时可清楚地看到其内有一个或两个核仁,偶尔还能见到三个核仁的细胞核。有时在撕取表皮时,细胞已破裂,核与质均流出,就看不见了,一般的细胞核都包括下列三部分:核模,包围在细胞核的外面;核质,充满整个细胞核;核仁,为核质中1-3个发亮的小颗粒。 液泡:有一个或几个,位于细胞的中央,里面充满细胞液,所以比细胞质透明。按上述要求观察了活的洋葱表皮细胞之后,取下制片,从盖玻片的一侧边缘滴一滴碘液,再用吸水纸从相对的一侧吸水,使染料流入材料中,进行染色,此时细胞已被杀死,细胞质被染成浅黄色,细胞的各部分显示得较为清楚。? 3、质体的观察(1)叶绿体及细胞质运动现象:取一片黑藻茎尖嫩叶,放入载玻片的水滴中,盖上盖玻片,在高倍镜下观察,叶绿体也是浸没在细胞质中的,紧贴细胞之内,有时以其宽面正对我们,即紧贴细胞的上壁或下壁,常呈扁圆形;有时则紧贴侧壁,使我们看到的是其窄面。同时,在黑藻叶片细胞里还可看到叶绿体随胞质运动而作一个或几个方面的流动(温度在25度左右最适宜)。 (2)白色体:白色体是不含色素的质体,所以无色。多存在于植物的幼嫩细胞或不见光的细胞中,取大白菜的幼叶或叶柄做徒手切片;或者撕取表皮。用蒸馏水装片置于显微镜下观察,在细胞质中无色的颗粒就是白色体。 (3)有色体:有色体是仅含叶黄素和胡萝卜素的质体,由于二者比例不同,可呈黄色、橙色或橙红色,常存在于成熟的果肉细胞中或
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