菌落的测定和大肠杆菌总数要点.ppt

豆豉中菌落总数的测定 豆豉中菌落总数的测定检验程序 一、实验原理 是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中形成的细菌菌落总数。以 CFU/g（mL）来表示。稀释后菌样中的微生物单细胞分散在琼脂平板上，培养后每个活细胞可形成一个单菌落，即形成单位（colony forming units，cfu），根据每个培养皿形成的cfu数乘以稀释度，就可以推算出菌样的含菌数。 按国家标准方法规定，即在需氧情况下， 36 ±1℃培养48±2 h，能在平板计数琼脂上生长发育的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。一定条件包括培养基成分、培养温度和时间、pH、是否需要氧气等。 二、实验试剂与仪器 试剂：0.85%生理盐水、琼脂培养基：胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1000mL、pH 7.0±0.2 仪器：恒温培养箱、托盘天平、电炉、吸管、三角瓶、培养皿、普通试管、试管架、酒精灯、灭菌刀或剪刀、75%酒精棉球、玻璃蜡笔，灭菌枪头。 三、实验步骤 1、检样稀释及培养 （1）以无菌操作，将检样包装打开，称取25g 豆豉，放于含有225ml灭菌生理盐水的500ml灭菌玻璃三角瓶内（瓶内预先置适当数量的玻璃珠），经充分振摇做成1：10的均匀稀释液