唾液淀粉酶活性观察浅析.pptVIP

唾液淀粉酶活性观察 ——食品生物化学 实验设计 了解T、pH、抑制剂和激活剂 酶活力的影响 酶活性受T、pH、[S]、{E}、激活剂和抑制剂影响 蓝—紫红—黄 表示酶促反应又慢到快 碘遇淀粉变蓝 吸收波长峰值：660nm 酶活力单位定义：100ml唾液中的淀粉酶 37℃ 15min 5mg淀粉 试剂：0.5%硫酸铜溶液、0.5%蔗糖溶液、0.5%氯化钠溶液、1g/L淀粉溶液、碘化钾-碘溶液、缓冲溶液 器材：试管及试管架、移液管、量筒、镊子、脱脂棉球、水浴锅、可见分光光度计 唾液淀粉酶的制备 稀释唾液：唾液原液稀释100倍 T对酶活性的影响 T 试管号 淀粉溶液/ml 稀释唾液/ml 蒸馏水/ml 0℃冰水浴 1 5 1 0 0℃冰水浴 2 5 0 1 37℃水浴 3 5 1 0 37℃水浴 4 5 0 1 沸水浴 5 5 1 0 沸水浴 6 5 0 1 +2滴 碘化钾-碘溶液 摇匀 测量吸光度（660nm） pH对酶活性的影响 编号 pH 缓冲液A/ml 缓冲液B/ml A 5.9 90.0 10.0 B 6.2 81.5 18.5 C 6.5 68.5 31.5 D 6.8 51.0 49.0 E 7.1 33.0 67.0 F 7.4 19.0 81.0 G 7.7 10.5 89.5 H 8.0 5.3 94.7 缓冲溶液的配制 pH对酶活性的影响 最适pH的测定 16支试管+5ml淀粉溶液+1ml缓冲液 奇数号 偶数号 + 1ml稀释唾液 + 1ml蒸馏水 混匀 ， 37℃水浴 15min 测吸光度 激活剂和抑制剂对酶活性的影响 试管号 淀粉溶液/ml 1%硫酸铜/ml 0.5%NaCl/ml 稀释唾液/ml 蒸馏水/ml 1 5 1 0 1 0 2 5 1 0 0 1 3 5