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第8课时 动物细胞融合与单克隆抗体
[目标导读] 1.掌握动物细胞融合的原理和方法。2.结合P53图2-24,归纳单克隆抗体的制备过程及应用。
[重难点击] 单克隆抗体的制备和应用。
1.将小鼠细胞和人体细胞融合成杂交细胞后,各自的表面蛋白质平均分配到膜表面(如图),该实验说明了细胞膜具有一定的流动性。
2.抗体的化学本质是免疫球蛋白,是由浆细胞分泌的,能和抗原特异性的结合。
3.癌细胞在体外培养的条件下,只要提供合适的营养条件就能无限增殖。
[课堂导入]
我们知道,运用植物体细胞杂交技术,可以跨越植物种属间生殖隔离的屏障,培育出新的作物类型。那么能不能也利用这种技术来培育动物新品种呢?今天我们就来学习动物细胞融合及其应用。
探究点一 动物细胞融合
科学家经过长期的探索,也实现了让不同种动物的体细胞进行杂交。完善下图,回答问题。
1.动物细胞融合是指两个或者多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,融合后形成的单核细胞,称为杂交细胞。
2.动物细胞融合的原理是什么?
答案 细胞膜的流动性。
3.融合方法
(1)物理、化学方法:与植物体细胞杂交相同,如聚乙二醇、电激等。
(2)生物方法:灭活的病毒。
4.杂交细胞融合成功的标志是杂交细胞进行有丝分裂。
5.细胞融合技术与传统的有性杂交相比,其优越性在于克服远缘杂交的障碍。
归纳提炼
动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
原理 方法步骤 诱导方法 结果 用途或意义 动物细胞融合 细胞膜具有流动性 分散成单个细胞后诱导细胞融合 物理方法 化学方法生物方法 形成杂交细胞培育杂交细胞或大量获得细胞产物 植物体细胞杂交 ①细胞膜具有流动性
②植物细胞具有全能性 酶解法去除细胞壁后诱导原生质体
融合,形成杂种细胞后培育成杂种植株 物理方法化学方法 形成杂种植株 克服远缘杂交不亲和的障碍 活学活用
1.如图所示为细胞融合技术的一些过程,据图回答下列问题。
(1)从A细胞和B细胞到C细胞的过程中,采用的方法中与诱导植物原生质体融合不同的是__________处理。
(2)若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞,那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了______________。这种酶可能是__________、__________,由此生成的细胞经培养形成的细胞团称为______________。
(3)若将基因型为AaBB的番茄细胞与基因型为AAbb的番茄细胞融合,由融合细胞培养成的愈伤组织细胞的基因型是__________。
(4)若将染色体组成为2A+XX的人细胞与染色体组成为2B+XX的鼠细胞融合,培育成的人-鼠细胞的染色体组成是______________。
答案 (1)用灭活的病毒处理 (2)细胞壁 纤维素酶 果胶酶 愈伤组织 (3)AAAaBBbb (4)2A+2B+2X+2X
解析 (1)动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。(2)植物细胞有细胞壁,若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞,那么这样的细胞已经用纤维素酶和果胶酶脱掉了细胞壁;植物体细胞杂交获得的杂种细胞,经脱分化形成愈伤组织。(3)(4)细胞融合后的染色体或基因分别是两种细胞的染色体或基因累加。
探究点二 单克隆抗体的制备
动物细胞融合技术的最重要用途是单克隆抗体的制备,阅读教材并思考:
1.传统抗体的获得
(1)方法:①向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体;②从动物血清中分离所需抗体。
(2)特点:产量低、纯度低、特异性差。
2.单克隆抗体的制备原理
细胞 特点 B淋巴细胞 能产生单一抗体,但不能无限增殖 骨髓瘤细胞 能无限增殖,但不能产生抗体 融合细胞 既能产生抗体,又能无限增殖 3.单克隆抗体的制备过程
(1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的抗原蛋白,然后从小鼠体内获得相应的B淋巴细胞。
(2)细胞融合:融合的方法常用聚乙二醇、灭活的病毒、电激等,这时得到的融合细胞除了杂交瘤细胞,还有B淋巴细胞相互融合的细胞和骨髓瘤细胞相互融合的细胞。
(3)筛选:用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞。这时候的杂交瘤细胞既能分泌抗体同时又能大量增殖。
(4)克隆化培养和抗体检测:从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特异性杂交瘤细胞。
(5)培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体:将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖,从细胞培养液或小鼠的腹水中提取单克隆抗体。
4.由上述抗体的产生过程我们可将单克隆抗体的定义归纳为:由杂交瘤细胞大量繁殖所产生的、化学性质单一、高度特异性的抗体。
5.单克隆抗体的应用
(1)优点:特异性强、灵敏度高、产量大。
(2)应用
①作为诊断试剂,具有准确、高效、简易、快速的优点。
②用于治疗疾病和运载药物。
归纳提炼
单克隆抗体制备过程中的二次筛选
(
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