10核酸的生物合成课程.ppt

第一节 DNA的生物合成 (复制)  DNA Biosynthesis，Replication DNA复制的特征 ? 半保留性 ? 原核生物只有一个复制起点,真核生物有多个复制起点 ? 多为双向性 ? 半不连续性 ? DNA的两条链都从5?端向3?端延伸 ? 高保真性 一 半保留复制 概念：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板，按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整接受过来，另一股单链则完全重新合成，两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致，这种复制方式为半保留复制。 ?半保留复制的意义 按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。 遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。 二 双向复制 原核生物 基因组是环状DNA 只有一个复制起始点 原核生物复制时，DNA从起始点(origin) 向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 三、半不连续复制 顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为领头链。 复制方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长，这股不连续复制的链称为随从链。复制中的不连续片段称为冈崎片段(okazaki fragment)。 复制叉----DNA双链解开分成两股，各自作为模板进行复制，形成在显微镜下可看到的叉状结构。 (3) 起始的过程 ? 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。 ?多复制子 复制子(replicon)：相邻两个复制起点之间的距离。复制子是独立完成复制的功能单位。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 参与者： DNA-pol α (引物酶活性) pol δ (聚合酶、解螺旋酶活性) 拓扑酶 复制因子 (replication factor, RF) 增殖细胞核抗原 (proliferation cell nuclear antigen, PCNA) (相当于原核生物DNA-pol Ⅲ β亚基，在复制起始和延长中起关键作用) (一) 概念 逆转录指遗传信息从RNA流向DNA，是RNA指导下的DNA合成过程，即以RNA为模板，四种dNTP为原料，合成与RNA互补的DNA单链。 (二) 逆转录酶 催化逆转录过程的酶称逆转录酶，RNA病毒中都含有此酶,全称为依赖RNA的DNA聚合酶。 具有三种酶活性： RNA指导的DNA聚合酶 RNA酶 DNA指导的DNA聚合酶 （一）转录模板 结构基因(structural gene): DNA分子上转录出RNA的区段 。 模板链(template strand): DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，也称作有意义链或Watson链。 编码链(coding strand): DNA双链中与模板链相对的单链，不进行转录，也称为反义链或Crick链。 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 顺式作用元件(cis-acting element) ：可影响自身基因表达活性的DNA序列。 帽子结构 ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 本章重点 复制 转录 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ （3） 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC) 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC Pol-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 （4）. 拼板理论(piecing theory) 一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间互相结合，生成有活性，有专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。 2 转录延长 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位