细菌内双组分信号传导要点.pptVIP

组氨酸激酶CheA与甲基趋化受体MCP的细胞质信号区域由连接因子CheW连接，形成一个MCP-CheW-CheA三元复合体CheA蛋白是双组份调控系统中的传感激酶，在ATP存在的情况下可发生自我磷酸化，将磷酸基团转移给CheY，使CheY发生磷酸化 许多鞭毛马达旋转方向由细胞内CheY和CheY-P的比率来控制，鞭毛马达的逆时针和顺时针构象是以平衡状态存在的。CheY-P与FliM和FliN（转动复合物的成分）结合，使鞭毛倾向于进行顺时针旋转。FliM和FliN上具有34个CheY-P结合位点，结合位点被占据的越多，鞭毛顺时针旋转相应地上升。最终调解运动方向 四、双组分系统 转导通路的研究方法 模板来自于 / * 模板来自于 / * WesternBlot可以确定被检测蛋白的大小，能区分特异性和非特异性的条带，但是不适合做精确的定量分析。ELISA可以进行比较精确的定量比较，但是不能确定检测蛋白的大小和特异性，也就是说非特异性的条带也会被计算进去。这两者都是使用抗体的方法。 * 细菌内双组分信号转导 一、概念 二、双组分信号转导系统的组成 三、双组份信号转导对生物学活性的调控作用 四、双组分系统转导通路的研究方法 五、双组分系统研究过程 一、概念 1.信号转导 2.微生物信号转导 3.细菌双组分信号转导 信号转导 细胞或者识别与之相接触的细胞，或者识别周围环境中存在的各种化学和物理信号 并将其转变为细胞内各种分子活性的变化，从而改变细胞的某些代谢过程，影响细胞的生长速度，甚至诱导细胞凋亡，这种针对外源信息所发生的细胞应答反应全过程称为信号转导(signal transduction)。 微生物信号转导 微生物是地球上最多变、适应性最强的有机体，尤其是细菌，能够在动植物无法存活的环境生长。 微生物拥有复杂而精密的信号系统来应对体内外环境变化，从而适应环境并得以生存。 细菌双组分转导 1.双组分系统是广泛存在于原核和真核细胞中的信号转导系统 ，主要由组氨酸蛋白激酶（HPK）和响应调节蛋白（RR）两个组分组成。 2.双组分系统信号通路一般包括信号的输入 、HPK自身磷酸化、信号输出等环节。 3.从细菌的角度，当它入侵宿主体内时，环境中各种营养物质的含量、温度、渗透压和PH值等都发生了改变，同时一些毒性物质也出现在其生存的环境中，因此，细菌为了生存，其必然拥有一套特有的对外部环境持续监控的信号系统，以检测环境中各种生理因素的改变，并据此迅速调节自身的结构和生理行为，达到适应新环境和生存繁殖的目的。 二、双组分信号传导系统的组成 双组分信号通路 HPK感受到外界环境信号后,使RR磷酸化,将外界信号传递到胞内.整个双组分信号通路由信号输入(input)、HPK自身磷酸化、RR磷酸化及输出（output)等环节构成 双组分信号转导系统的组成 经典的双组分信号传导系统由组氨酸激酶 [histidine kinase，HPK]又称为传感器激酶 和反应调控蛋白(response regulator，RR)组成。 双组分系统只负责信号的输入、转导、输出。信号的识别和感受是由其他分子,如细胞表面受体或运输蛋白来完成,由它们再将信号传递到HPK。 双组分信号传导系统的组成 组氨酸激酶 HPK 紧贴最外层跨膜部分，位于胞质内。是细菌感应各种环境变化必需的，通常是由两个单体组成的同源二聚体膜蛋白，每个单体含有一个可变 的传感器结构域 和一个保守的传递器结构域 。其传感器结构域负责检测和编码输入信息。 双组分信号传导系统的组成 组氨酸激酶的传递器结构域由N端DHp(二聚化组氨酸磷酸转移 )结构域和C端CA(催化结合ATP)结构域组成。DHp结构域能形成一个稳定的二聚体结构，其上含有一个能发生自身磷酸化组氨酸位点；CA催化结构域由保守的N、G1、F和 G2盒组成，含有一个与ATP结合的基序。DHp和 CA结构域连接在一起，使ATP的磷酸基团转移到DHp上的组氨酸位点上，所有双组分系统的传递器结构域都是保守的。 双组分信号传导系统的组成 反应调控蛋白 RR 位于胞质内。是双组分信号转导系统 中的第二个组分，含有一个或多个保守的N端接受器结构域又称为输入结构域和可变的 C端效应器结构域又称为输出结构域 。反应调控蛋白控制输出信息 。 双组分信号传导系统的组成 反应调节蛋白在其N端为接收器，大约具有120个保守性的氨基酸顺序和磷酸化位点。C端功能区具有DNA结合或其它调节功能,对其目标基因进行转录调控。接收器元件和输出功能区常由易弯曲的衔接物连接。 双组分信号传导系统的组成 当外界或内部环境发生变化时 ，组氨酸激酶 的传感器结构域能够感应