一种基于激光全息共聚焦扫描显微镜测量透明液体三维温度的应用研讨.docxVIP

一种基于激光全息共聚焦扫描显微镜测量透明液体三维温度的应用Peter B. Jacquemin*，Rodney A. Herring1(University of Victoria, Department of Mechanical Engineering, 3800 Finnerty Road, BC, Canada V8P 5C2）摘要：激光全息共聚焦扫描（CSLH）显微镜是利用一束聚焦激光束测量流体温度在三维空间的分布情况。激光束通过样品并被参考光束干涉形成全息图。折射率的变化将引起全息图边缘移位。边缘移位取决于材料的温度、压力或者成分。层析重建算法是为了显微镜而派生出的基于光束的数值孔径的算法。窄视角扫描受限于激光探测样品的数值孔径和锥角大小，这些因素会增加样品三维数据的误差。显微镜的全息术摄影保留了全息图中基于ak/10波边缘的0.1C敏感温度下对象的相位。通过实验数据得到在三维重建中的温度分辨率在1C。激光全息概念和层析重建全息图数据的方法可以被应用于测量精密的位移、温度、压力以及构成激光波长附近位置的分辨率。微流体和其他领域的研究和应用技术将会考虑到激光全息共聚焦扫描的这种独特的测量特点。关键词：共聚焦；显微镜；全息图；激光；三维重构1.介绍赫林[1]在1997年首次公开发布了结合共聚焦显微镜和全息术概念得到的一个3D显微镜图像。相比只对振幅和光强度敏感的光学显微镜而言，全息显微镜可以记录下研究对象的振幅和相位甚至于光线的全部信息。标准光学显微镜下的样本会吸收光谱能量，这会忽视相位性能和对折射率的敏感程度。激光全息共聚焦扫描显微镜的全息图是利用激光传输通过标本产生的折射率累积效应的测量方式。相移是全息图边缘移位表现出的，全息图的边缘移位是由于折射率的改变的。折射率是由介质或者样本中的光波长以及透过样本的广成长度决定的。激光全息共聚焦扫描显微镜的公交特点降低了图像的像差，同时利用迪克逊[2]等人研发的特殊光学几何结构提高三维扫描图像的分辨率。激光全息共聚焦扫描显微镜的全息技术提供了一种利用相位测量样品折射率的方法。样品的相位通过折射率值的推算就可以推导出基于光学特性的流体的温度。激光焦点在样品中的点扩散函数为170lm，这是通过Zemax光学系统的设计软件和实验测量出的。当扫描的计算网格增加625lm/步，在三维环境下（立体像素大小），每625lm的计算网格内都能产生独立的分辨率。然后再结合多组扫描全息图就可以重建样品的三维折射率。利用激光与样品相互作用的测量结果表现为传感器或全息图中的厚度累积效应。通过样本长度的累计折射率通常被称为层析重建中的氡线积分。侯赛因和沙克赫尔[3]在这个试验中已经利用激光扫描到了样本中的三维图形。侯赛因和沙克赫尔[3]解释了相位解缠但只能得到透过样本厚度的平均温度。Tieng和Chen[4]应用了一种改进后的联立代数方程重建技术对空气流动进行三维重建，但是基于几何构型的敏感性存在误差。激光全息共聚焦扫描显微镜限制了激光探针探测样本时的扫描角度的数值孔径，这样会导致重建矩阵和矩阵的奇异性出现差错。激光全息共聚焦扫描显微镜的挑战在于在一个受限制的扫描视角中产生较低的重建误差。高分辨率的全息图是利用8184像素的CCD线扫描相机记录下的。激光全息共聚焦扫描显微镜的一个独特的特性是样品的完整3D折射率可以从没有任何旋转扫描的单一视角或者观测窗口中得到。扫描光束穿过样品只采用探针重建的数值孔径。3D成像的两个要求即是激光全息共聚焦扫描显微镜成像的需求。样品相对于射线必须是透明的，同时扫描探针必须是一个汇聚光束而不是一个平面光。不同之处在于汇聚光束透过样品作为焦点的是扫描沿着光束的传播轴，而平面光不能区分透过样品路径的任何焦点。每一次扫描都会给出全息图测量的累计厚度折射率。这需要一个由雅克曼和赫林[5,6]提出的名为“威利”的独特的重构方法，从而将厚度扫描全息图转化为3D模式。3D模式指出了样品某一点的相位和强度。“威利”算法利用所有的相位测量和已知的边界条件计算样品每一点的折射率。另一种基于断层扫描三维重建的方法也是为激光全息共聚焦扫描显微镜而开发，这种方法是为了显示样品的几何信息从而被莱[7]等人提出。“威利”算法的优点在于不需要提前验证样品信息。共聚焦光学扫描全息术的更详尽的研究由雅克曼[8,9]等人实施。一种简单的生成全息图的方法如图1所示，将物体光束和参考光束并排连接，构成的夹角使得重叠的部分和其他部分在相机中生成全息图。这种光学布局需要在扫描时移动样品，同时激光全息共聚焦扫描显微镜利用电流计光束控制反射镜从外侧转化为样品的激光探针焦点。图1参考光束与物光束在图像平面叠加形成全息图1.1.与其他全息显微镜的相似和异同激光全息共聚焦扫描显微镜是类似于相位成像显微镜，它对透明样本的相移很敏感