第4章抗体4节概念.pptVIP

第四章 抗 体 抗体与免疫球蛋白的区别 一、抗体的基本结构 重链(heavy chain,简称H链) 重链（2） 轻链(light chain,简称L链) 在轻链的可变区(VL)内部有三个超变区,氨基酸残基位置分别位于26～32,48～55,90～95,这三个部位的氨基酸变化特别大。 其余的氨基酸变化较小,称为骨架区。 免疫球蛋白的轻链根据其结构和抗原性的不同可分为κ型和λ型两个型 κ型和λ型轻链的差别主要表现在C区氨基酸组成和结构的不同,因而抗原性不同,这也是轻链分型的依据。 Ig的绞链区 3、其它结构 J链 连接链(joining chain,简称J链) Ig中单体之间就是依靠J链连接起来的 J链是一条分子量约为20000的多肽链,内含10％糖成分,富含半胱氨酸残基。以二硫键的形式与免疫球蛋白的Fc片段共价结合 J链是由产生IgM、IgA的同一浆细胞所合成的, 起稳定多聚体的作用 分泌片(secretory component,SC) 分泌成分是分泌型 IgA所特有的一种特殊结构,是一种分子量约 60000～70000的多肽链,含 6％糖成分。 由局部粘膜的上皮细胞所合成的,当IgA与J链在浆细胞内合成并连接,在通过粘膜上皮细胞的过程中,后者所合成的SC与之结合在一起,形成分泌型的二聚体。 促进上皮细胞积极地从组织中吸收分泌型IgA,并将其释放于胃肠道和呼吸道内的作用;防止IgA在消化道内为蛋白酶所降解,从而使IgA能发挥免疫作用 通常的抗体又可分为可溶性和膜结合型 免疫球蛋白的Fc的长度不同 二、可变区和恒定区 三、抗体的功能区及其功能 A.VH-VL这是抗体分子结合抗原的所在部位。 B.CH1-CH4为遗传标志所在。 C.CH2为抗体分子的补体结合位点,与补体的活化有关。 D.CH3与抗体的亲细胞性有关, IgG同一些免疫细胞的Fc受体结合就是这个部位。 四、抗体的酶解片段 五、抗体的抗原性 一、五类抗体分子的功能及特点 IgG的免疫学功能 IgG在动物体内不仅含量高,而且持续时间长,在体内可发挥抗菌,抗病毒,抗毒素等免疫学活性。 肿瘤特异性抗原的lgG抗体的Fc片段可与巨噬细胞,K细胞等表面的Fc受体结合,从而在肿瘤细胞与这些效应细胞之间起着搭桥作用,引起ADCC作用从而杀伤肿瘤细胞等靶细胞。 IgG是引起Ⅱ型、Ⅲ型变态反应及自身免疫病的抗体,在肿瘤免疫中体内产生的封闭因子可能与IgG有关。 IgM IgM具有抗菌,抗病毒,中和毒素等免疫活性,由于其分子上含有多个抗原结合部位,所以它是一种高效能的抗体,其杀菌、溶菌、溶血、促进吞噬(调理作用)及凝集作用均比 IgG高(大约高 500～1000倍)。 IgM也具有抗肿瘤的作用,在补体的参与下同样可介导对肿瘤细胞的破坏作用。 IgM可引起Ⅱ型和Ⅲ型变态反应及自身免疫病而造成机体的损伤。 IgA 血清型的IgA同样具有抗菌、抗病毒、抗毒素等免疫学活性。 分泌型的IgA对机体呼吸道、消化道等局部粘膜免疫起着相当重要的作用,特别是对于一些经粘膜感染的病原微生物 分泌型lgA是机体粘膜免疫的一道“屏障”。在传染病的预防接种中,经滴鼻、点眼、饮水等途径免疫,均可产生相应的粘膜免疫力。 IgE IgE在抗寄生虫感染中具有重要的作用,如蠕虫感染的自愈现象就与IgE抗体诱导过敏反应有关。 已有的研究表明,蠕虫、血吸虫和旋毛虫等寄生虫病,以及某些真菌感染后,可诱导机体产生大量的IgE抗体。IgE可使嗜酸性粒细胞向局部游走,而且能介导ADCC作用,杀死蠕虫。 IgD 二、抗体的生物学功能 多克隆抗体的制备 抗原决定簇刺激B细胞克隆产生特异性抗体。 传统制备抗体的方法获得的免疫血清实际上是多种抗体的混合物，称为多克隆抗体(PcAb)。 抗体的发展 1.免疫动物 (1)抗原 完全抗原、半抗原 抗原用量 (2)佐剂及乳化 协助抗原缓慢释放 (3)免疫动物 制备抗血清的动物 注射途径 取决于动物种类、抗原特性和是否使用佐剂 腹腔、肌肉、皮内、皮下适合于任何抗原，反应局部淋巴结 静脉注射适合可溶性抗原及分散单细胞，不加佐剂，反应脾脏 2.抗血清的纯化和保存 (1)采血 (2)抗血清的纯化及保存 饱和硫酸铵盐析或层析 3.抗血清的特性鉴定 滴度 表达抗血清中特异性抗体含量的一个半定量指标，即给定的条件下，结合一定量抗原的抗血清稀释度 亲和力 表示抗血清与相应抗原的结合强度 抗体特异性与交叉反应 单克隆抗体 由一个仅识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同源抗体，为单克隆抗体(McAb)。 单克隆抗体特点：