军团菌综述-140723.docxVIP

军团菌综述军团菌（Legionella）是引起军团病（legionnairesdisease，LD）的病原菌，是兼性胞内寄生菌，系革兰氏阴性杆菌，是由于1976年在美国费城退伍军人年会中首次发现的急性发热性肺部疾病而被命名的。广泛存在于自然界，在土壤和水中可以长期存活，自来水中可以存活1年以上。军团菌主要寄生在水中的原生动物体内，尤其是30℃~40℃热水系统为军团菌提供了一个非常良好的孳生环境，对人体健康造成很大的威胁。在建筑给水系统中，特别是封闭的公共卫生场所检出率高。目前已确认军团菌有50多个种，70多个血清型，其中20多种与人类疾病相关，常见的有嗜肺军团菌（legionellapneumophila，LP）、麦氏军团菌、长滩军团菌、博氏军团菌、菲氏军团菌、杜氏军团菌等，其中嗜肺军团菌是引起流行性、散发性社区获得性肺炎和医院内获得性肺炎的重要病原菌。嗜肺军团菌有15个血清型，都有致病性。其中1型在人军团菌肺炎中最常见，估计70%~90%的军团菌病是由1型嗜肺军团菌引起的。军团菌主要是从饮用水系统、空调冷却水、淋浴喷头水等与人群密切接触水体以气溶胶的形式经呼吸道传播给人，引起严重的肺部炎症-军团菌病。但是与其他介水传播疾病不同的是其并无粪-口传播途径。已证实在开挖土壤、河渠时可有军团病暴发流行。空调器、冷却水及湿润器、喷雾器内的水均可受本菌污染。本病传播同饮食无关，已排除人间接触传播。人群普遍易感，以中老年人多见，男性多于女性。散发病例中医院内感染占5%;全部病例中院内感染的可占20%以上，死亡率为7%~24%。有慢性病患者，长期接受血液净化治疗或肾移植患者、肿瘤患者、应用免疫制剂者以及嗜烟酗酒者易患本病。发病后6~7d血清特异性抗体滴度上升，5w达高峰，数月后下降。军团病初期症状为轻微的咳嗽、不舒服、肌肉酸痛、低热或者还有些消化道症状，与普通感冒和流感症状类似，所以在临床上很难诊断；后期症状是高热、下呼吸道感染和肺炎的表现，X线可以看到明显的肺部病变。由于军团菌种类繁多，常规的检测鉴定方法已不能满足需要。近年来，随着分子技术特别是PCR技术的发展，已有许多分子生物学方法被用于军团菌的检测，实时荧光定量PCR（real-timefluorescentquantitativepolymerasechainreaction，FQ-PCR）技术就是其中之一。该技术于1992年提出，并在1996年由AppliedBiosystems公司首先推出，实现了PCR从定性到定量的飞跃。作为一种在PCR技术基础上发展起来的核酸定量手段，FQ-PCR技术具有高灵敏性、高特异性、高精确度、实时性及污染少等优点，短短的几年便在军团菌检测研究中得到广泛应用。一、 产品预期用途1产品预期用途：本试剂盒用于人鼻咽拭子、痰液、胸腔积液、肺组织活检样本中军团菌和嗜肺军团菌的DNA定性检测，可用于呼吸道感染的临床辅助诊断。2与预期用途相关的临床适应症背景情况：目前已确认军团菌有50多个种，70多个血清型，常见的致病的军团菌有20多种，23s-5srRNA基因在各菌种中都较为保守，文献报道针对该序列设计引物探针进行检测，具有很高的敏感性和特异性，能够通用检测军团菌感染；mip基因编码巨噬细胞感染增强子蛋白是一种在多种胞内寄生菌的细菌表面均有表达的外膜蛋白，对嗜肺军团菌进入到阿米巴和巨噬细胞有促进作用，同时还可以破坏细胞的杀菌功能。研究表明，mip基因有足够的序列差异来区分嗜肺军团菌和非嗜肺军团菌。3相关的临床或实验室诊断方法：目前军团菌的检测方法主要有血清学检测法、免疫血清学方法、尿抗原检测法、PCR法。细菌学培养法作为检测嗜肺军团菌的金标准,其优点是对疾病的诊断具有良好的敏感性和特异性，可以作为临床确诊和鉴定标准。但是其不足之处是需特殊培养基，价格昂贵，培养比较困难，细菌生长比较慢，要3~7d以上才能出结果，不利于临床的快速诊断，而且对实验人员的技术要求比较高,费时费力。免疫血清学方法常用酶免疫分析法（enzymeimmunoassay，EIA）或间接免疫荧光法（indirectfluorescentantibody，IDFA）检测病人血清中嗜肺军团菌抗体IgM。具有简便、快速的优点，对疾病的早期诊断有较大的参考价值，但敏感性较培养法低。采用单克隆抗体检测病人血清中嗜肺军团菌抗原，能提高阳性检出率。用EIA还可以检测血清中IgG总抗体，但是IgG总抗体出现的时间较晚，不能用于对疾病的早期诊断，可用于回顾性诊断和嗜肺军团菌疾病的流行病学回顾性调查。我国对军团菌的一些流行病学调查大多都应用这一方法。尿抗原检测方法检测尿中嗜肺军团菌抗原是一种经济、快速的诊断试验。常用的有放射免疫法（radioimmunoassay，RIA）、EIA、直接荧光抗体法（directfl