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中农威特生物科技有限公司 专业知识 正文 口蹄疫病-OIE 2006年5月版 [话题作者：OIE 话题来源：OIE 添加时间：2007.1.4] 摘 要 口蹄疫Foot and mouth disease (FMD)是哺乳动物的烈性传染病，特别容易引起易感偶蹄动物发病并造成巨大经济损失。口蹄疫病毒有七个血清型，即O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia1，型与型之间没有免疫保护。临床症状不易与猪水泡病、猪口膜炎、泡疹等其它水泡性疾病区分。紧急签定只能依靠实验室诊断。 明显的临床症状是蹄部、口腔粘膜和母畜乳腺出现水泡。临床症状分中度和重度，有时会造成幼畜死亡。有些动物会出现亚临床感染，如非洲水牛(Syncerus caffer)。诊断用组织是未破裂或刚破裂的水泡皮、水泡液，如果采集不到上述材料也可采集血液和/或用探杯（probang cup）收集反刍动物的OP（oesophageal–pharyngeal fluid）液，用试子收集猪的咽喉液。如果动物死亡可收集心肌或血液，如果有水泡，水泡更易诊断。 按照国际标准把采集的可疑病料的包装完好，病料只能送到权威机构。 只有在组织样品或者水泡液中分离到病毒或者口蹄疫病毒抗原或者核酸口蹄疫的才能确诊。检测病毒特异性抗体也可以确诊。不管是免疫还是没有免疫的动物，根据非结构蛋白抗体水平可以检测病毒感染情况。 诊断机构: 口蹄疫病毒性抗原或者核酸阳性就能确诊。由于口蹄疫病毒具有高致病性和经济影响特性，诊断实验室和血清型检测应该在符合OIE 4级病原微生物实验室标准。 由于酶联免疫吸附试验敏感、不受补体激活物和抑制物的影响，补体结合试验 (CF)在许多实验室已经被酶联免疫吸附试验取代。如果病料不足或者诊断不清楚，可用病料接种易感细胞或者2－7天吮乳小鼠扩增病毒。较适宜的细胞是初代牛甲状腺细胞，猪、羊、或者犊牛肾细胞，或者其它敏感的传代细胞也可以使用。水泡液可以直接用于补体结合试验、ELISA或者反向聚合酶链反应。也可以用死亡小鼠的胴体研磨悬液做上述试验。 由于RT－PCR快速、敏感，现在逐渐用于核酸诊断试验。电镜检查病料有时也用于签别诊断。 血清学试验：没有免疫的动物有水泡并检测到非结构蛋白的话，可以做出阳性诊断。此种情况主要适用于温和型病症或者收集不到水泡皮的时候。与免疫没有关系，口蹄疫病毒非结构蛋白的检测可以诊断出宿主的病毒繁殖前期或者病毒繁殖期。非结构蛋白不同于结构蛋白，它是高度保守的，没有血清特异性。 病毒中和试验 (VN)：结构蛋白ELISA可以进行血清签别试验。因为病毒中和试验依靠的是组织培养，所以比ELISA更能说明病毒的活性，但是速度慢，易污染。ELISAs 检测抗体速度快，不依赖细胞培养。ELISA可以用没有活性的抗原做，所以对于实验室生物安全要求低。 疫苗和生物诊断的要求：市场上有不同类型的灭活疫苗，通常是用病毒感染悬浮细胞或者单层细胞，然后澄清再用二乙烯亚胺灭活后加佐剂。由于不同地区流行不同的病毒型，所以许多口蹄疫疫苗是多价的。 疫苗最终产品中不得含有活病毒。通常是在浓缩灭活病毒还没有配苗前用活体试验检测，而对疫苗中活病毒的检测则用体内和/或体外试验检测。尽管疫苗中抗原含量与保护率、抗体反应的相关关系已经建立起来了，但仍对免疫牛进行攻毒试验检测PD50(50% protective dose)或者蹄部感染的总体保护（generalised foot infection PGP)确定疫苗的效价。 生产口蹄疫疫苗的场所要符合OIE4级病原生物安全要求。 OIE口蹄疫参考实验室和FAO口蹄疫参考实验室提供诊断试剂。Pirbright动物健康实验室肩负着OIE和FAO世界口蹄疫实验室的双重职责。 A. 介绍 口蹄疫病是由细小病毒属的口蹄疫病毒引起。共有七个血清型，即O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia1，所有七个血清型都能引起偶蹄疫动物发病。不同的血清型之间没有免疫保护，大多数毒株可以用生化或免疫试验鉴别。 在非洲，口蹄疫病毒主要由黄牛和非洲水牛携带，它们是主要的宿主。有证据显示如果没有非洲水牛，家畜和其它野生动物持续感染期只有几个月。尽管也有家养猪、绵羊、山羊携带病毒的实例，但是世界上其它地方黄牛通常是病毒存贮者。这可能是在一定条件