第三节血液其他检查技巧.ppt

1.温氏法 将抗凝血液标本灌注于温氏管中，在一定条件下离心得到红细胞在全血中所占体积的百分比。 5层：血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和带氧红细胞层。结果读取以还原红细胞层为准。 2.微量法 采用一次性使用的毛细玻璃管，将抗凝血离心后测量其中的红细胞柱、全细胞柱和血浆柱的长度。 红细胞柱的长度除以全细胞柱和血浆柱的长度之和即为血细胞比容。 WHO推荐的首选方法。 3.血细胞分析仪测定法（电阻抗法） 由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出， Hct＝红细胞计数×红细胞平均体积。 准确性不及微量离心法。 质量控制 1、采血：防止血液稀释、凝固或溶血，毛细血管微量法测定，应弃去第1滴血。 2、抗凝剂：目前多选用肝素、EDTA-K2或EDTA-Na2用于血细胞比容测定。 质量控制 5、结果判读与分析：温氏法-读取自还原红细胞层以下的红细胞的高度。微量法-微量管底部的红细胞基底层与标准读数板的基线重合后再读数。 红细胞形态异常或红细胞增多时会使细胞间残余血浆量增加。 参考区间（温氏法） 男性：0.380 ～ 0.508； 女性：0.335 ～ 0.450 临床意义 1、增高见于： ⑴血液浓缩 ⑵红细胞增多症 ⑶新生儿 2、降低见于： ⑴贫血—但是减少程度并不与红细胞计数相一致 ⑵充血性心力衰竭、妊娠和输液过多等稀释血症。 临床意义 3、可用做真性红细胞增多症、临床输血及输液治疗疗效观察的一项指标。 4、可用做计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度的基础数据。 5、可作为血液流变学指标 三、红细胞平均值计算 平均红细胞体积（MCV） 平均红细胞血红蛋白含量（MCH） 平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC） 指红细胞群体中各个细胞体积的平均值 以fl为单位 MCV=HCT/（RBC/L）=HCT*L/RBC 1、平均红细胞体积（MCV） 平均红细胞血红蛋白含量（MCH） 指红细胞群体中各个红细胞血红蛋白含量的平均值 以Pg为单位 MCH=(Hb g/L)/(RBC/L) 平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC） 指平均每升红细胞所含血红蛋白的浓度 以g/L为单位 MCHC=(Hb g/L)/HCT 参考区间和临床意义见书本 第三节 血液其他检查 一、网织红细胞计数 1.原始红细胞 a. 胞体：d:15-20μm，圆形或椭圆形，边缘常有钝角状或瘤状突起。 b. 胞浆：量少，深蓝色(油墨蓝)，不透明，无颗粒，核周淡染(鱼肚白)。 c. 胞核：圆形，居中或稍偏于一旁，染色质呈细致颗粒状。 核仁1-2个，大小不一，染浅蓝色。 图 原始红细胞 2. 早幼红细胞 a. 胞体：d:15-18μm，圆形或椭圆形。 b. 胞浆：量多，蓝色，不透明，仍有瘤状突起，核周淡染区 。 c. 胞核：圆或椭圆形，居中或稍偏位，染色质浓集呈烟丝状或粗密的小块，较原红粗糙，核仁模糊或消失。 图 早幼红细胞 3. 中幼红细胞 a. 胞体：d:8-15μm，圆形。 b. 胞浆：不同程度的嗜多色 性：灰蓝色、灰色、灰红色。 c. 胞核： 圆形或椭圆形，核染色质凝聚成条索状或块状，有明显空隙，如打碎墨砚感。核仁完全消失。 图 中幼红细胞 4. 晚幼红细胞 a. 胞体：d:7-10μm，圆形 。 b. 胞浆：量多，浅灰，浅红色或同成熟红细胞染色。 c. 胞核：圆形，居中或偏位，核染色质凝聚成块状。 图 晚幼红细胞 红细胞 胞体直径7-8μm，双凹圆盘状，粉红色，边缘较深，中央较淡。 红细胞的发育过程 晚幼红细胞脱核后2天发育成完全成熟的红细胞 网织红细胞（reticulocyte，Ret或RET） 是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞。 网织红细胞是晚幼红细胞刚刚脱去核的阶段，胞质中尚残存嗜碱性物质核糖核酸（RNA），经碱性染料（煌焦油蓝、新亚甲蓝）活体染色成蓝色网状或颗粒状结构。 新亚甲蓝染色 煌焦油蓝染色 Ⅰ型 Ⅱ型 Ⅲ型 Ⅳ型 网织红细胞的分型及形态特征： 1、显微镜计数法： 特殊染色法 Miller窥盘计数法 【测定方法和评价】 特殊染色法： 染色原理 RNA的磷酸基团带有负电 新亚甲蓝、煌焦油蓝的有色反应基团带正电 形成核酸和碱性染料的复合物多聚体 WHO推荐使用新亚甲蓝 网织红细胞百分数=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/1000 网织红细胞绝对数（个/L）=网织红细胞百分数×红细胞数/L 特殊染色法： 特殊染色法： 涂片制备的两种方法 玻片法和试管法 试管法为手工法网织红细胞计数的推荐方法。 Miller窥盘计数法 将窥盘放置在目镜中，小格内计数所有成熟的红细胞，大格内（含小格）计数网