改良富血小板血浆对髓间充质干细胞增殖与免疫原性的作用.docVIP

改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞增殖与免疫原性的作用*★ 李斯翰1，2，段建民2，李洪涛2，文 军2(1南方医科大学研究生学院，广东省广州市 510000；2解放军广 文章亮点： 1 实验特点在于采用液氮反复冻融的方法激活血浆中血小板颗粒裂解释放生长因子，相比较加入外源性物质(氯化钙、人或牛凝血酶)的激活方式，可以减少外源性物质所带来的潜在感染风险。 2 从组织工程的安全性考虑，采用自体来源生长因子对间充质干细胞进行体外培养可以最大限度减少外源性血清的使用，为体外培养细胞提供了更为安全且接近机体的培养环境。 关键词： 干细胞；骨髓干细胞；骨髓间充质干细胞；富血小板血浆；骨髓血；增殖；免疫原性；生长因子；细胞移植；省级基金；干细胞图片文章 主题词： 间质干细胞；骨髓；富血小板血浆；细胞移植 基金资助： 广东省科技计划项目(2011B031800201)*，课题名称：改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞与乳牙髓干细胞体外扩增及成骨分化作用的对比实验研究 摘要 背景：课题组前期实验发现改良富血小板血浆对人牙髓细胞增殖的促进作用具有浓度依赖性，以10%浓度尤为明显。 目的：观察不同浓度改良富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞体外生长增殖的作用效果，以及最佳浓度改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞免疫原性的影响。 方法：使用健康志愿者捐献骨髓血培养的第三四代人骨髓间充质干细胞，行流式细胞术及成脂、矿化诱导分化鉴定。将由同一志愿者采集的静脉血制备的改良富血小板血浆作用于人骨髓间充质干细胞，以CCK-8法测定细胞增殖变化，绘制生长曲线。选取最适合人骨髓间充质干细胞增殖的改良富血小板血浆浓度，以体积分数10%FBS培养基为对照，通过流式细胞术测定连续培养3代的人骨髓间充质干细胞表面Stro-1的表达率。 结果与结论：5%-10%的改良富血小板血浆在培养第6，8天均显著促进了骨髓间充质干细胞的增殖，其中以10%浓度组尤为显著在培养第10天仍显著促进了骨髓间充质干细胞的增殖且细胞表面Stro-1的表达率连续3代均高于对照组。说明改良富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞增殖的促进作用具有浓度依赖性，10%改良富血小板血浆可以较好地保持人骨髓间充质干细胞的免疫原性。 Improved platelet-rich plasma effects on the proliferation and immunogenicity of human bone marrow mesenchymal stem cells Li Si-han1, 2, Duan Jian-min2, Li Hong-tao2, Wen Jun2 (1Graduate School, Southern Medical University, Guangzhou 510000, Guangdong Province, China; 2Department of Stomatology, Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Region, Guangzhou 510000, Guangdong Province, China) Abstract BACKGROUND: Previous experiments have shown that improved platelet-rich plasma can promote the proliferation of human dental pulp cells in a concentration-dependent manner, particularly when the concentration is 10%. OBJECTIVE: To investigate the effect of platelet-rich plasma at different concentrations on the proliferation and immunogenicity of human bone marrow mesenchymal stem cells. METHODS: Human bone marrow mesenchymal stem cells from healthy donors were cultured and passaged for 3-4 passages, identified by flow cytometry and differentiation inductions. Platelet-rich plasma samples which were manufactured from the venous blood