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学生研究计划项目总结报告 黑曲霉有外加碳源时改性条件对吸油实验的影响 一、绪论 溢油吸附剂是能吸收液态油的材料。吸附剂通过吸收、吸附, 或者两者同时作用来回收溢油。吸收是允许溢油进入材料, 吸附则将溢油吸附在表面但不允许溢油进入材料内部[1]。现在广义上的吸附包括吸收和吸附。溢油吸附剂由于其将油从液态转移到半固态的功能，并能够具有完全将油清除的可能性[2]，在过去和现在都被广泛的使用。良好的吸附剂一般是海绵状，其表面有孔，利用表面活性，能把油吸收到内部孔隙里达到去除目的。目前，可生物降解的具有回用性的吸油材料的研发成为处理溢油事故处理的趋势[3] 。 玉米秸秆作为天然的溢油吸附剂，可通过真菌改性提高其吸油量。以玉米秸秆作为黑曲霉固体发酵培养基的基质，利用黑曲霉代谢分泌木质纤维素酶，由内向外降解木质纤维素，同时黑曲霉在生长过程中产生的菌丝机械穿插作用，增加玉米秸秆的孔隙，使比表面积增大，达到对玉米秸秆改性的效果。对黑曲霉改性玉米秸秆制备溢油吸附剂的反应条件（温度、反应时间、含水率和菌体投加量）及机理进行了初步的探讨。 生物科学与工程学院 B6-434 保藏的一株黑曲霉， 下保存在马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基（PDA）上。 取自广州市大学城穂石村，2010 年 7 月和 12 月破碎筛分的 20-40 目玉米秸秆广州石化黄埔分公司提供，放置于通风橱中 48 h 至接近恒重，将原油中易挥发的有机化学组分去除。PDA培养基成本低，属于天然培养基，是培养真菌的经典培养基。PDA培养基营养丰富，实验发现黑曲霉在PDA上的生长速度明显快于察氏培养基。本实验用PDA培养基作为保存菌种的培养基。 表2-2 PDA培养基配方 Table 2-2 Reagent detail list of PDA 药品名称 用量 去皮新鲜切成小块的马铃薯 200g 葡萄糖 20g 琼脂 20g 水 1000ml 黑曲霉对玉米秸秆进行改性时的固体发酵培养基所添加的无机盐营养液采用察氏培养基的配方，为让菌体更好地适应固体发酵的条件，菌体活化时采用察氏培养基。 表2-3 察氏培养基配方 Table 2-3 Reagent detail list of Czapek Dox Agar 药品名称 用量 药品名称 用量 NaNO3 3g FeSO4 0.01g K2HPO4 3H2O 1g 蔗糖 30g MgSO4·7H2O 0.5g 琼脂 20g KCl 0.5g 蒸馏水 1000ml 表2-4 固态发酵营养液配方 Table 2-4 Reagent detail list of solid fermentation’s nutrient fluid 药品名称 用量 药品名称 用量 NaNO3 1.2g FeSO4 0.004g K2HPO4 3H2O 0.4g 蔗糖 12g MgSO4·7H2O 0.2g 蒸馏水 100ml KCl 0.2g 注：（1）无外加碳源的实验设置中不需加入蔗糖； （2）自然pH（有蔗糖的营养液pH=8.58,无蔗糖的营养液pH=8.43） （3）1.5 g玉米秸秆原材料中加入0.75ml固体发酵营养液 本研究中所使用的主要试剂设备如表2-6所示 表2-6 试剂详细资料表 Table 2-6 Reagent detail list 试剂名称 级别/纯度 生产产家 羧甲基纤维素钠 AR 天津市福晨化学试剂厂 微晶纤维素 柱层析 成都格雷西亚化学技术有限公司 酒石酸 AR 天津市科密欧化学试剂有限公司 酒石酸钠 AR 天津市科密欧化学试剂有限公司 乙酸（冰乙酸） AR 广州化学试剂厂 三水合乙酸钠 AR 广东省化学试剂工程技术研究开发中心 一水合硫酸锰 AR 广州化学试剂厂 丁二酸钠 AR 上海凌峰化学试剂有限公司 丁二酸 AR 天津市科密欧化学试剂有限公司 柠檬酸 AR 成都市联合化工试剂研究所 七水合硫酸镁 AR 广东省化学试剂工程技术研究开发中心 硫酸亚铁 AR 台山市粤侨试剂塑料有限公司 硝酸钠 AR 汕头市光华化学厂 氯化钾 AR 天津市科密欧化学试剂有限公司 本研究中所使用的主要试剂设备如表2-6所示 表2-6 试剂详细资料表 Table 2-6 Reagent detail list 试剂名称 级别/纯度 生产产家 羧甲基纤维素钠 AR 天津市福晨化学试剂厂 微晶纤维素 柱层析 成都格雷西亚化学技术有限公司 酒石酸 AR 天津市科密欧化学试剂有限公司 酒石酸钠 AR 天津市科密欧化学试剂有限公司 乙酸（冰乙酸） AR 广州化学试剂厂 三水合乙酸钠 AR 广东省化学试剂工程技术研究开发中心 一水合硫酸锰 AR 广