急性呼吸窘迫综合征试题.ppt

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急性呼吸窘迫综合征 (Acute respiratory distress syndrome,ARDS) 中南大学基础医学院 邹江 【理论复习】 ARDS的定义 ARDS的病因 【定 义】 多种原发病过程中,因急性肺损伤引起的急性呼吸衰竭,以进行性呼吸困难和顽固性低氧血症为特征 【病因】 直接肺损伤因素:严重肺部感染、肺挫伤、吸入有毒气体等 间接肺损伤因素:肺外严重感染及脓毒症、严重胸外创伤、急重症胰腺炎等 【实验目的】 复制急性呼吸窘迫综合征的实验动物模型 观察急性呼吸窘迫综合征家兔的表现,并 探讨其发生机制 【实验动物】 家兔 (性别、体重) 【实验分组】 生理盐水组:0.2ml/kg生理盐水(NS) 经家兔耳缘静脉注入 油酸组:0.2ml/kg油酸(OA)经家兔耳 缘静脉注入 1.称重 2.固定:背部交叉仰卧位固定 3.记录呼吸曲线: 张力换能器 BL-410系统 【实验步骤】 4.给药:耳缘静脉注入,油酸组(0.2ml/kg油酸、缓慢、2分钟注射完),生理盐水组(0.2ml/kg生理盐水) 5.给药后记录家兔呼吸情况,1小时后处死家兔 6.在甲状软骨下缘2-3cm 行颈部正中切口,分离气管后夹闭并游离气管和食道,开胸,小心取出心脏和肺,细心剪去食管、心脏及肺门周围组织,观察肺外观,并称重计算肺系数 肺系数 = 肺重(g)/ 体重(kg) 7.肺泡灌洗(bronchoalvage lavage,BAL) 方法:将橡皮管插入气管后用线固定,然后用注射器将10ml生理盐水正压缓慢注入肺内,反复抽吸三次,回收灌洗液,灌洗液于3000rpm/min,离心15min,细胞沉淀用1ml生理盐水重悬 8.取10ul重悬液抹片,染色,显微镜下观察细胞细胞种类 【注意事项】 油酸注射应平稳在2分钟注完,并保证全部注入静脉内,溢出或注入皮下组织均可造成模型复制失败 切断气管前注意先夹闭,避免血液、组织液等进入影响实验结果 分离肺脏时勿损伤肺表面,以免肺内水肿液外流,影响肺系数的准确性和肺泡灌洗液的收集 【实验结果】 生理盐水组 油酸组 呼吸幅度与频率 肺大 体观 颜色 质量 支气管肺泡灌洗液 细胞数目与分类 指标 分组 发绀 0’ 15’ 30’ 60’ 给药前 给药后 肺系数 I II Ⅲ I II Ⅲ 推片→染色→显微镜下观察并描述涂片 低倍镜计数 高倍镜分类 【细胞涂片的制作与白细胞染色分类】 推片:取一滴重悬细胞液置于载玻片的一端,左手持载玻片,右手以边缘平滑的推片的一端从悬液前方后移接触悬液,悬液即沿推片散开。然后按推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动,载片上保留下一层薄膜,涂片制成后可手持玻片在空气中挥动,使细胞膜迅速干燥,以免细胞皱缩 染色:取几滴瑞士染色液加在涂片上,2分钟后,用自来水洗净,将玻片风干 涂片观察:显微镜下观察涂片,对比描述细胞数目和细胞种类 正常大鼠的肺切片HE染色 油酸诱导的大鼠肺切片HE染色 【讨论】 本次试验制备的家兔急性呼吸窘迫综合征的实验动物模型是否成功? 静脉注射油酸为什么会引起急性呼吸窘迫综合征? 急性呼吸窘迫综合征的治疗措施有哪些? 1. 实验名称、实验时间、实验人员 2. 实验目的 3. 实验动物 4. 实验步骤 5. 实验结果(列表) 6. 实验讨论 7. 实验结论 【实验报告】

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