新人教版选修15.1《DNA的粗提取和鉴定》学案.docVIP

课时1 DNA的粗提取与鉴定 一、实验目的： 初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。[来源:Zxxk.Com] 二、实验原理： 1．DNA的溶解性： 思考题1：DNA在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点？对此有什么应用？ 思考题2：利用什么原理来将DNA与蛋白质分离开？ 2．DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解 ，但对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 ℃的高温，而DNA在 ℃以上才会变性。 能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 3．细胞在 中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜的破裂，据此可得到含有核DNA的溶液。[来源:学科网ZXXK][来源:学,科,网Z,X,X,K]DNA，下列所采取的措施中，最恰当的是：向经抗凝剂处理的鸡血液加入 （ ） A．蒸馏水 B．ATP C．0.3g/mL的蔗糖溶液 D．二氧化碳[来源:学科网ZXXK] DNA提取的实验材料是 （ ） A．鸡血细胞 B．蛙的红细胞 C．人的成熟红细胞 D．菜花 3．用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后，还要用酒精处理，可以得到较纯化的DNA．这是因为： ） 　　ADNA易溶于酒精，而滤液中某些杂质不易溶于酒精BDNA不易溶于酒精，而滤液中某些杂质易溶于酒精CDNA和滤液中其他成分更易溶于酒精DDNA和滤液中其他成分都不溶于酒精 ） 试剂 操作 作用 A[来源:学.科.网] 与鸡血混合 防止血液凝固 B 蒸馏水 与鸡血细胞混合 保持细胞形状 C 蒸馏水 加入到溶解有DNA的NaCl中 析出DNA丝状物 D 冷却的酒精 加入到过滤后DNA的NaCl中 产生特定的颜色反应 5．在进行DNA粗提取实验时，为得到含DNA的黏稠物，某同学进行了如下操作： 在新鲜鸡血中加入适量的柠檬酸，经离心后，除去血浆留下血细胞备用。 取5―10ml血细胞放入50ml的塑料烧杯中，并立即注入20ml 0.015mol／L的氯化钠溶液，快速搅拌5分钟后经滤纸过滤，取得其滤液。 滤液中加入40ml 2mol／L的氯化钠溶液，并用玻璃棒沿一个方向快速搅拌1分钟。[来源:Z。xx。k.Com] （1）指出并改正上述实验操作中的错误： ， ， 。 2 要进一步提取DNA时，需加入冷却的酒精，其作用是 和 。 3 能否用牛血或牛肝代替鸡血做实验？ 为什么？ [来源:Zxxk.Com] 6．在DNA粗提取与鉴定的实验中，选择适当浓度 的NaCl溶液就能充分溶解DNA而使杂质沉淀， 或析出DNA过滤去除溶液中的可溶性杂质。请 在右图中作出DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线。 参考答案 思考题： 思考题1、DNA在氯化钠溶液中的溶解度，随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0．14mol/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出； 思考题2、DNA不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步地分离。 思考题3、DNA遇二苯胺（沸水浴）被染成蓝色，所以可用二苯胺作鉴定。 思考题4、不能。因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数DNA，在实验中很难提取到。 思考题5、加速了鸡血细胞的破裂 细胞膜和核膜的破裂 ，从而释放出DNA；蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂。 思考题6、使氯化钠溶液浓度接近0．14mol/L，使DNA最大限度地析出。 思考题7、不一样；这次过滤是为了去除不溶于氯化钠溶液的杂质，而上次过滤是为了去除破裂的细胞膜等物质。 思考题8、除去含有DNA滤液中的杂质； 思考题9、用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 思考题10、去除溶于酒精的杂质； 思考题11、可抑制核酸水解酶的活性，防止降解DNA；降低分子的运动，易于形成沉淀析出；低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。 思考题12、确定二苯胺不与氯化钠发生颜色反应；实验组试管中可看到溶液变蓝色。 课堂练习： 1．A 2．C 3．B 4．AC[来源:Zxxk.Com][来源:学|科|网] w.w.w.k.s.5.u.c.o.m