雷公藤双向固体发酵程中的化学成分变化研究.docVIP

雷公藤双向固体发酵过程中的化学成分变化研究 ［摘要］ 目的:研究雷公藤双向固体发酵过程中化学成分的变化规律。方法:采用紫外分光光度法测定雷公藤双向发酵 过程中总二萜和总生物碱含量;采用高效液相色谱法测定雷公藤双向发酵过程中雷公藤甲素和两个单体生物碱含量。结果: 在发酵 90 d 时，雷公藤总二萜发酵下降了 46% 而总生物碱含量仅下降约 13% ，雷公藤甲素含量降低了 89. 4% 而 wilforgine 和 wilforine 含量降级幅度较小。结论:双向发酵过程中真菌对雷公藤生物碱含量影响较小，而对二萜类化合物含量影响较大。 ［关键词］ 双向固体发酵;雷公藤;生物碱;二萜;雷公藤甲素 Study on Changes of Chemical Constituents in Tripterygium wilfordii during Process of Fermenting ［Abstract］ The content of total diterpenoids and total alkaloids were determined by UV spectrophotometry and triptolide and two main alkaloids contents were assayed by HPLC in order to study on the changes of chemical constituents in Tripterygium wilfordii during the process of fermenting. The results showed that after materials being fermented for 90 days，the content of total diterpene and total alkaloids decreased by 46% and 13% ，respectively，at the same time，triptolide content decreased by 89. 4% ，while the contents of wilforgine and wilforine decreased by little. It were concluded that fungi have large influence on the content of total diterpene in T. wilfordii F and less influence on total alkaloid during bi-directional fermentation in this paper. ［Key words］ Bi-directional fermentation;Tripterygium wilfordii;alkaloid;diterpene;triptolide 雷公藤 Tripterygium wilfordii HooK. 为卫茅科植 物，别名黄藤木、断肠草等。性味苦，有大毒，常以去 两层皮的根木质部入药，具有免疫抑制、抗肿瘤、抗 生育等多种药理活性。目前雷公藤及其制剂在临床 上已应用于治疗类风湿性关节炎、成人各种肾炎、系 统性红斑狼疮等多种自身免疫性疾病，是首选的中 药免疫抑制剂，但其临床应用毒副作用大的问题一 直未得到解决。国内外学者从多个方面探索了降低 雷公藤的毒副作用的方法，但均不能从根本上解决 雷公藤的毒性问题 ［ 1 ］ 。 本课题组在前期的研究中，采用“药用真菌新 型固体发酵工程”(简称双向发酵)用药用真菌对雷 公藤进行整体固体发酵，探索雷公藤的减毒持效(毒 性降低但仍然保持免疫抑制作用)，已筛选出了有效 发酵药用真菌菌种;建立了最佳发酵菌种工艺，得到 ·59· 第 16 卷第 10 期 2010 年 8 月 中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 16，No. 10 Aug. ， 2010了毒性降低并且仍然保持免疫抑制效果的灵雷菌质 ( G 30 ) 。测定了 G 30 急性毒性并观察了对抗炎、免疫 器官及细胞免疫的影响，并进一步研究了 G 30 对佐剂 性类风湿关节炎及阿霉素诱导的大鼠肾炎的作用， 结果已有文章发表 ［ 2-4 ］ 。本文进一步采用多种检测 手段从不同角度研究雷公藤双向发酵过程中化学成 分的变化规律，旨在探讨双向发酵雷公藤的解毒持 效机制，同时为确定灵雷菌质中主要药效 /毒性物质 基础及灵雷菌质新药材的质量控制提供实验依据。 1 材料 BS124S 电子天平 ( Sartoriu