高效液相色谱串联质检测地表水中五种生物胺_程小艳.docVIP

高效液相色谱串联质谱检测地表水中五种生物胺_程小艳 　　摘要:采用固相萃取及高效液相色谱串联质谱技术,建立了地表水中5种生物胺(腐胺、尸胺、2-苯乙胺、酪胺、色胺)的测定方法。水样中2-苯乙胺、酪胺和色胺可直接进样测定,腐胺和尸胺经HLB固相萃取柱富集,乙腈洗脱,氮吹浓缩至1.0mL后进样液相色谱串联质谱分析,以选择离子监测(SRM)模式定量分析。在本实验条件下,加标回收率在89.4%～122%之间,相对标准偏差2.15%～11.9%(n=7),检出限在0.05～5μg/L。关　键　词:生物胺;高效液相色谱串联质谱;固相萃取;地表水 　生物胺(biogenicamine)是一类具有生物活性 [1]的含氮低分子量有机化合物的总称,可看作是氨分子中1～3个氢原子被烷基或芳基取代后生成的物质。微量生物胺是生物体(包括人体)内的正常活性成分,在生物细胞中具有重要的生理功能,但生物胺在人体内蓄积到较高含量时就会产生毒性。腐胺、尸胺、2-苯乙胺、酪胺和色胺作为常见的生物胺,均属于剧毒化学物质,且水溶性很好。生物体死亡后,细菌分解其尸体产生一定量的上述物质,即造成水体污染。 目前应用于生物胺的测定方法有多种,如高效液相色谱或液质联用法(HPLC)、离子色谱法 (IC)、气相色谱法(GC)、毛细管电泳法 (CE)、薄层色谱法(TLC)等,由于生物胺类化合物的热稳定性较差,因此气相色谱法的应用受到限制而以高效液相色谱最为常用,但是该法往往需要柱前或柱后衍生技术。 2008年前我国尚未建立水体中生物胺的标准方法,汶川地震发生以后,由于腐烂的生物体产生的生物胺类化合物有可能会对地震灾区水质产生影响,因此亟需建立一种简单,快速,准确的方法检测水中腐胺浓度,以实现水质安全监控目的。在此情况下,我国颁布了GB/T21970-2008《水质组胺等五种生物胺的测定高效液相色谱法》,该方法需要将水样进行苯甲酰氯衍生后再用乙醚提取,最后高效液相色谱紫外检测器检测,测定范围2.0～40.0mg/L,存在检测灵敏度低,方法繁琐,分析周期长的问题。 本文采用HPLC-MS/MS联用选择离子监测及电喷雾电离离子化技术,不经复杂的衍生过程,直接或者富集后进样,该法具有灵敏、准确、简便、快速等特点。 公司);氨水(分析纯,成都科龙化工试剂厂);甲酸(色谱纯,美国TEDIA公司);甲醇(色谱纯,美国TEDIA公司);二氯甲烷、丙酮(农残级,美国J.TBaker公司);超纯水(电阻率18.2MΨ·cm,美国Millipore公司)。1.2　样品萃取 100mL水样通过0.45μm滤膜过滤,上样至固相萃取小柱(事先分别用5～8mL甲醇和去离子水活化),流速5mL/min。上样完成后,用8mL乙腈洗脱固相萃取柱,收集洗脱液,氮吹浓缩并定容到1.0mL,待分析。1.3　色谱分析条件 液相色谱柱:ACQUITYUPLCHSST3色谱柱(2.1×50mm,ID1.8μm,美国Waters公司);流速为0.2mL/min;柱温30℃;流动相为20%甲醇-80%10mmol/L甲酸胺/甲酸(pH=2)缓冲液;进样量为10μL。1.4　质谱条件电离源为电喷雾电离源(ESI),正离子检测,检测方式为选择离子反应监测(SRM)模式,去溶剂气和锥孔反吹气均为高纯氮气,碰撞气为氩气。选择反应监测母离子、子离子、碰撞能量和质谱调谐条件见表1。 1　实验部分 1.1　仪器与试剂 高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪(LC-Accela,MS-TSQQuantumAccess,美国热电公司);自动固相萃取仪(GX-274,美国Gilson公司); OasisHLB固相萃取小柱(500mg,6mL,美国Wa-ters公司),OasisMCX固相萃取小柱(500mg,6mL,美国Waters公司),DSC-18固相萃取柱(1g,6mL,美国Supelco公司),氮吹仪(N-EVAP111,美国Organomation公司);分析天平(SI-234,美国Denver公司。 腐胺标准(10g,美国CHEMSEVICE公司);尸胺标准(0.25g,99%,美国DrEhrenstorferGm-bH公司);2-苯乙胺标准(25mL,日本东京仁成工业株式会社);;酪胺标准(5g,97%,美国AC-ROS公司);色胺标准(10g,98%,美国J＆Kchemica公司);乙酸铵(色谱纯,美国TEDIA 表1　质谱调谐条件Tab.1　MStunecondition 喷雾电压(V)鞘气压(Psi)离子吹扫气压(Psi)辅助气压(Psi)毛细管温度(℃)管透镜(V)母离子(m/z)子离子(m/z)碰撞能量(V)扫描宽度(m/z)碰撞气(mTorr)扫描时间(s)数据类型 　　注:＊为定量离子。 腐　胺300025053007089.