蛋白质翻译学案.ppt

前胰岛素原的加工 四、对A 位 aa—tRNAaa 的两次校对（成肽前） Φ EF—Tu 的酶的专效作用的第一次校对 Φ 密码子和反密码子结合能力的第二次校对 A位上的正确的密码子和反密码子的结合能力比错误 的高3000倍 Prok. EF—Tu催化GTP水解后，错配的氨酰tRNA 将从核糖体中剔除 Euk. EF1 第五节 蛋白质前体的 加工与转运机制 一、蛋白质前体加工 初级产物多肽链 天然蛋白质 残基的去除、AA侧链的修饰、多肽链折叠成二级、三级甚至四级结构 蛋白质的体内折叠 1、 邹承鲁假说：体内蛋白质折叠存在与肽链合成同步进行 （co-translation） 实验证据：肽链合成尚未结束的β－半乳糖苷酶具有 免疫原性和酶的活性 2、参与蛋白质折叠的两类蛋白质－－助折叠蛋白 a、酶： 如蛋白质二硫键异构酶---加速正确二硫键的生成 肽酰脯氨酰顺反异构酶---催化肽-脯氨酰间肽键的旋转反应 酶蛋白的N端－－天然肽的结构与功能 对邹氏模型的有力支持 b、分子伴侣（molecular chaperone） Laskey等人提出 组蛋白＋核质素→→核小体 指一类在细胞内帮助新生肽链正确组装成为成熟蛋白 质，而本身却不是最终功能蛋白质分子的组成成分的分 子，称为…… 3、分子伴侣的功能和种类 （1）功能 a、同一个分子伴侣可促进多种多肽链的折叠（无专一性） b、或者阻止多肽的错误折叠 如防止初始翻译的疏水端的错误折叠 （2）目前研究最多的两个蛋白质家族 ◎ 热休克蛋白Hsp70（heat shock protein , Hsp70） E.coli DnaK 参与蛋白质折叠、组装、跨膜、分泌与降解 ? 胁迫－70 家族 （stress-70） ? 分子伴侣家族 （chaperonin） Prok.和Euk. DnaJ协助DnaK的结合－－－－－有利于新生肽的折叠 GrpE解离复合物而反复循环 二、蛋白质的转运 机制－－ 易位与分泌 ( secretion) 两种途径（Euk.）： 共翻译易位 翻译后易位 蛋白质合成方式 ---游离的核糖体 In Euk. ---核糖体附着在粗糙内质网 (rough endoplasmic reticulum RER) 蛋白质合成扩散在细胞质内 进入顺式高尔基体 部分停留 选择， 加工，分泌，扩散 反式高尔基体 合成蛋白质 In Prok. --- 核糖体附着在细胞内膜（inner membrane） 合成蛋白质 穿过内膜进入间质（periplasm） 通过外膜 扩散到细胞外 1、细菌中蛋白质的越膜 信号肽（N端信号序列）:分泌蛋白的N端15～30个AA的前 导序列为越膜信号 1—10aa 15—20aa 15—30 aa 1—3 aa 富含Arg+, Lys+ ----- 富含 Phe, Leu, Ile… 亲水螺旋 疏水螺旋 反向平行，形成 hairpin S.S.酶切割位点 插入到膜中 （signal sequence S.S.） signal S. 带正电的区段与带负电的磷脂膜互作,引导蛋白质 进入内膜 疏水区段嵌入磷脂膜内或形成αhelix, --- 并对磷脂双层膜产生扰动效应， --- 诱发形成非脂双层结构， 以保证Signal S. 所牵引的蛋白质顺利穿膜 作用机制： 原核生物分泌性蛋白质穿膜的分子模式 α- α Helix hairping S.S. 酶 S.S. 2、真核生物中蛋白质的越膜（共翻译易位） 信号肽序列（S.S.）和原核类似 （1）越膜机制： a、S.S.在信号识别颗粒（signal recognition particle SRP ）的帮助下插入到粗面内质网中 SRP：RNA－蛋白质